甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒
說明書。
產品名稱]通用名稱：甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）。
產品名稱：甲型和乙型流感卡
包裝] 20 份盒裝。
有可能的用途]本品用於體外定性檢測人鼻咽拭子標本中甲型和乙型流感病毒核蛋白抗原。
甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）是一種體外免疫層析試驗，可以快速對甲型和乙型流感病毒感染做出輔助鑑別診斷。
試驗簡介
流感是一種高度傳染性的急性病毒感染，發生在呼吸道，屬於傳染病類別，可以通過咳嗽或打噴嚏時排出的活病毒氣溶膠在人與人之間傳播。 甲型流感病毒在每年的秋冬季節比乙型流感病毒更為流行和嚴重，最嚴重的流感病毒是由它引起的，而乙型流感則相對較輕。
甲型和乙型流感的快速診斷測試對於獲得有效的抗病毒藥物具有重要意義**。 流感的快速診斷不僅可以減少患者住院的天數，減少抗菌藥物的使用，還可以降低住院費用。
甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）為從鼻咽拭子標本診斷甲型和乙型流感提供了一種簡單快速的方法;使用方便，快速給出結果，急診科測試中提供的資訊可以幫助醫生選擇最佳選擇，並決定是否入院。
甲型流感病毒有許多亞型，其中一些可以在鳥類中找到。 2024年報告了人類甲型禽流感（H5N1，流感病毒的一種亞型，主要發生在鳥類中）*，從那時起，人群中出現了H5N1病例，這引起了人們對H5N1的擔憂，H5N1變異使其在人群中更具傳播性，並且由於記錄的禽流感患者比例較低，因此尚不清楚在這組患者中使用快速檢測的程度**。
測試原理]甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑（膠體金法）採用薄膜免疫層析技術，利用高靈敏度的單轉殖抗體檢測鼻咽拭子標本中甲型和乙型流感病毒的核蛋白抗原，這些單轉殖抗體與對照抗體一起固定在膜載體上，形成三條獨特的線。膜載體與其他試劑墊結合形成試紙。 試紙位於一塊稱為測試卡的鉸鏈紙板中。
拭子標本需要進行預處理：用洗脫液、生理鹽水或轉印介質等將標本從拭子中洗脫出來，將標本加入試紙頂部，關閉測試卡，根據有無紫紅色樣品線在15分鐘後報告結果。 在有效的試驗中，藍色對照線變為粉紅色。
主要成分]。
提供的材料：
1.測試卡：22 份。 它包含對甲型流感病毒核蛋白抗原具有高特異性的單轉殖抗體、與膠體金顆粒偶聯的甲型流感病毒核蛋白抗原具有高特異性的單轉殖抗體、與膠體金顆粒偶聯的對乙型流感病毒核蛋白抗原具有高特異性的單轉殖抗體、兔抗山羊IgG以及與膠體金顆粒偶聯的山羊IgG。
2.移液器：22份，移液器的體積是固定的（100公升），用於將樣品新增到測試卡中。 僅使用套件隨附的移液器或經過校準的移液器，以轉移 100 l 樣品體積。
3.陽性對照拭子：1份，滅活甲型流感病毒和滅活的哈爾濱乙型流感病毒（即乙型流感病毒）幹結合到拭子上。
4.陰性對照拭子：1 份，滅活的 A 組鏈球菌乾燥並與拭子結合。
5.對照拭子洗脫液瓶：2瓶，小瓶中含有約05毫公升洗脫液，用於處理測試對照拭子。
不包括但測試所需的元件（單獨提供）。
鼻咽拭子配件包：
鼻咽拭子：甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）使用無菌拭子，可以用其他帶有彈性手柄的無菌鼻咽拭子代替，詳見標本採集和處理部分。
拭子標本洗脫液瓶：1瓶，小瓶含有約05毫公升洗脫液，用於拭子標本的預處理以進行測試。 可以使用轉印介質或生理鹽水代替洗脫液，詳見標本採集和處理 - 介質轉印部分。
推薦但未提供的材料。
時鐘、秒錶或秒錶;洗鼻液 沖洗液收集器。
儲存條件和有效期]。
2 儲存在30°C，有效期為24個月。
包裝標籤上標明了生產日期和有效期。 試劑成分在有效期前相對穩定，禁止使用過期試劑。 開啟包裝後，應立即將未使用的測試卡放回裝有乾燥劑的袋子中並密封儲存。
樣品要求]使用新鮮採集的標本進行檢測，標本採集不足或標本處理和運輸不當可能導致假陰性結果。
鼻咽拭子。 使用無菌棉、人造纖維、泡沫和帶彈性手柄的聚酯鼻咽拭子採集鼻咽標本，不推薦使用鈣浴酸拭子進行該試驗。 '
在標本採集後 i 小時內洗脫拭子標本並盡快進行檢測。 在用該測試盒測試之前洗脫的拭子樣本可以儲存 2 8 小時，持續 24 小時。 如果需要，試樣可以在 2 8 上的防漏容器中運輸。
在使用此試劑盒進行測試之前，將所有樣品平衡至室溫並輕輕旋轉混合。
傳輸介質
以下培養基已經過測試，可用於該試劑盒。
艾公尺斯中等。
心腦輸液。 杜爾貝科的媒介。
漢克平衡鹽溶液。
M4 中等。
M4-RT培養基。
M5 中等。
M6 中等。
磷酸鹽緩衝液。
鹽水斯圖爾特'中等。
磷酸酶肉湯。
UTM-RT培養基。
小腿輸液。 蔗糖磷酸鹽緩衝液已被確定不適合該測定。
試驗方法]試樣預處理。
用運輸介質洗脫鼻咽拭子。
在 05 比 3通過在0ml鹽水或轉移介質中劇烈攪拌來清洗拭子。 有關可選的轉印介質，請參閱標本採集和處理部分。 進入檢測程式。
用試劑盒中的洗脫液洗脫拭子（對照拭子和樣品拭子）：
2.將待測拭子插入測試瓶中，將拭子在液體中用力轉動 3 圈。
3.在從瓶子中取出拭子之前，將拭子擠壓在瓶壁上並轉動它，使標本從拭子中取出。
4.丟棄拭子。
5.使用該試劑盒盡早檢測測試瓶中的液體樣品。 進入檢測程式。
檢測程式。 1.測試前，從袋子中取出測試卡並將其平放在工作台上。
2.擠壓移液器上的吸球，將移液器吸頭插入試樣中，當吸頭在試樣中時鬆開吸球，將液體吸入試管中。 確保管子下部沒有空氣。
3.按照測試卡上的箭頭找到試紙上部的白色樣品墊，然後緩慢地將整個液體（100μl）從移液器新增到墊的中間，以便所有樣品都吸附到墊中。 不要將標本新增到紫紅色墊上。
4.立即從測試卡上取下粘性襯裡，關閉測試卡，並在 15 分鐘內讀取。
視窗中的結果。 早於 15 分鐘或晚於 15 分鐘的結果可能不準確。
注意：讀取結果時，如有必要，請傾斜面板以減少結果視窗中的強光。
測試結果的解釋]。
對於負面結果，視窗底部的藍色控制線將變為紫色左側，而不顯示其他線。
pink control line
對於甲型流感陽性標本，藍色對照線變成紫紅色，上面的中間標本線也變成紫紅色，只要有標本線，即使顏色很淺，結果也是陽性的。
pink sample line
pink control line
對於乙型流感陽性標本，藍色對照線變為紫紅色，標本上部的標本線也是紫紅色，只要有標本線，即使顏色很淺，結果也是陽性。
pink sample line
pink control line
如果控制線仍為藍色或根本沒有出現，則無論試樣線是否存在，結果都是無效的。 使用新的測試卡重新測試。
測試方法的侷限性]。
陰性結果並不能排除甲型和乙型流感感染的可能性，因此應將甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）獲得的結果與臨床檢查相結合，以做出準確的診斷。 如果需要其他測試來區分甲型和乙型流感病毒的特定亞型或毒株，請諮詢您所在國家或地方的衛生部門。
甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）可以檢測甲型和乙型流感的死病毒和活病毒，檢測效能取決於標本中的抗原載量，可能與同一標本的細胞培養結果無關。
甲型和乙型流感病毒靶表位區域氨基酸的微小變化可能導致單轉殖抗體檢測不到或檢測靈敏度降低。
甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）用於監測抗病毒**的效能尚未確定。
體外診斷試驗的陰性和陽性**值高度依賴於疾病的患病率，假陰性結果更有可能發生在高患病率的高峰期，而假陽性結果更有可能發生在病毒活性低的輕度至中度流行期間。
不建議使用含有肉眼可見血液的標本進行本試劑盒檢測。
通過鼻腔吸入接種甲型流感疫苗的個體可在接種快速流感檢測試劑盒後三天內發生。
陽性結果。 兒童比成人排出更多的病毒，持續時間更長，因此成人對流感體外診斷的敏感性低於兒童。
產品效能指標]。
期望值
流感流行每年都不同，典型的暴發主要發生在秋季和冬季，流感檢測陽性率取決於許多因素，包括標本採集方法、使用的檢測方法、地理位置以及特定地區的疾病流行情況。 甲型流感與最嚴重的流感流行密切相關，而乙型流感則更為溫和。 在 2004 年呼吸系統疾病季節和 2004-2005 年呼吸系統疾病季節在美國境外進行的多中心臨床研究中，甲型流感的平均患病率為 18%（由病毒細胞培養確定），乙型流感的平均患病率為 3%0
臨床表現
在2024年呼吸系統疾病高發季節，在美國以外的中心實驗室開展了多中心、前瞻性的臨床研究，在2005-2024年呼吸系統疾病高發季節，美國的三個實驗機構也進行了同樣的研究，通過這些研究建立了甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）的操作特點。 從美國南部、東北部和中東地區的醫生實驗室、診所和醫院以及瑞典的一家醫院的有症狀患者身上收集臨床標本，並回顧性研究這些冷凍標本。
臨床研究
甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）檢測效能及細胞培養/dfa比較前瞻性研究
從兒童（18歲以下）和**（≥18歲）中共收集了846份標本，並使用甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）進行了前瞻性評估，並與培養的DFAs進行了比較，其中男性佔44%，女性佔56%，兒童佔54%，*佔人口的46%。 患者的性別和年齡對檢測結果沒有影響，此時的 A H3 和 A H1 是 Kushito 流感的毒株。
甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）與細胞培養DFA在標本型別和95%置信區間方面的技術效能比較如下圖所示。
帶細胞培養的甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）/dfa甲型流感檢測效能比較
檢測靈敏度
標本++-+靈敏度%95%置信區間。
甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）與細胞培養DFA在乙型流感檢測效能中的比較。
檢測靈敏度試驗的特異性
標本 ++—+靈敏度% 95% CI -+—特異性% 95% CI。
鼻咽拭子 2 2 50% 9-91% 346 0 * 99-*
甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）與細胞培養DFA檢測效能的比較：回顧性研究。
採用甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）對293份冰凍標本進行評價，並與培養的DFA進行比較。 所有標本均採集自美國南部、東北部和中西部地區的醫學實驗室、診所和醫院，以及瑞典一家醫院的有症狀患者，53%的檢測人群為男性，47%為女性; 未成年人（18歲以下）佔62%，成年人（18歲或以上）佔38%。 患者的年齡、性別和標本型別對檢查結果沒有影響。
甲型和乙型乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）和細胞培養DFA在標本型別和95%置信區間方面進行了比較。
甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）與細胞培養DFA在甲型流感檢測效能中的比較。
測試靈敏度 測試特異性。
標本 ++A +靈敏度 % 95% CI – +— 特異性 % 95% CI。
鼻咽拭子 19 8 70% 50-86% 77 9 90% 81-95%。
帶細胞培養的甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）/dfa乙型流感檢測效能比較。
測試靈敏度 測試特異性。
標本 ++—+靈敏度% 95% CI -+—特異性% 95% CI。
鼻咽拭子 0 0 n a n a 111 2 98% 93-*
分析敏感度
該試劑盒的檢測限定義為檢測 95% 陽性結果的流感病毒濃度。 通過評估北京滅活甲型流感和哈爾濱滅活乙型流感不同濃度的檢出限。
12 名操作員對每種濃度進行了 2 次測試，即每個水平測量 24 次。 以下結果確定北京甲型流感的檢出限為103 10ng ml，乙型流感在哈爾濱的檢出限為605 × 10¹ng/ml。
分析反應性
下列甲型和乙型流感病毒株的濃度在甲型、乙型和抗原檢測試劑盒（膠體金法）中呈陽性。 儘管引起人類感染的特定流感毒株每年都不同，但它們都含有該試劑盒檢測到的保守核蛋白靶標 2。 在H1和H3亞型流行期間，建立了用於檢測人類標本中甲型流感病毒的甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）的操作特徵。 作為人類病原體出現的其他甲型流感病毒亞型的實驗操作特徵尚未確定。
腦膜炎奈瑟菌。
乾燥奈瑟菌。
奈瑟菌淡黃色。
尋常變形桿菌。
銅綠假單胞菌。
粘質沙雷氏菌。
金黃色葡萄球菌。
金黃色葡萄球菌（Cowan 蛋白 A 菌株）。
表皮葡萄球菌。
A組鏈球菌。
B組鏈球菌。
C組鏈球菌。
F組鏈球菌。
變形鏈球菌。
肺炎鏈球菌。
干擾物質。 使用甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）在以下濃度下評估呼吸道標本中天然存在的以下物質或人為因素引入鼻腔或鼻咽的物質，未發現對檢測效能的影響。 全血 （1%） 並不排除對該試劑盒陰性結果的解釋，但排除了對陽性甲型流感標本檢測限的解釋，因此，血液標本可能不適合該檢測。
物質濃度。
4—acetamidophenol omg/ml
乙醯水楊酸 15mg ml
albuterol 20 mg/tril
Zermine 5毫克毫公升
美沙芬10毫克毫公升
diphenhydramine 5 mg/ml
20 mg/ml
傳輸介質
以下運輸培養基作為陰性標本（不存在病毒）使用甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）進行檢測，並在接種甲型和乙型流感檢測限水平後進行檢測。 培養基不影響本試劑盒的檢測效能，培養基與本試劑盒分開檢測時結果為陰性，接種甲型和乙型流感病毒檢測限的培養試劑盒檢測試劑盒結果為陽性。
心腦輸液。 杜爾貝科的媒介。
hank'S 鹽平衡溶液。
M4 中等。
M4-RT培養基。
M5 中等。
M6 中等。
磷酸鹽緩衝液。
鹽水。 stuarfs media
磷酸胰蛋白酶肉湯。
UTM-RT培養基。
小腿輸液。 現在已知蔗糖磷酸鹽緩衝液不適用於該測定。
可重複的研究
在一項單盲研究中，使用甲型和乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（膠體金法）在三個機構隨機分配陰性、弱陽性和陽性標本，參與者每天多次檢測，持續三天，與預期結果的符合率為 97% （242 250），檢測內無顯著差異（1 名操作人員重複檢測）， 檢測之間（三天）、機構之間（三個機構）和操作員之間（六個操作員）。
【注意事項】。
1.體外診斷。
2.使用前將測試卡密封在袋子中。
3.禁止使用過期的試劑盒。
4.禁止混合來自不同套件的成分。
試紙頂部的白色樣品墊包含用於從病毒中提取目標抗原的試劑，為了優化操作，將標本緩慢（一滴一滴）新增到試紙墊的中間，以便將所有標本吸入墊中。
用於製作對照拭子的溶液已通過標準方法滅活，但患者標本、參考物質、測試卡等仍應被視為能夠傳播疾病的物質。
如果根據衛生機構的當代臨床和流行病學檢測標準*，如果出現新的疑似甲型流感感染，應採取適當的感染控制措施採集致命性新型流感病毒標本，並送往國家或地方衛生部門進行檢測。 在這些情況下，除非有 BSL3+（生物安全 3 級）裝置可以接收和培養此類標本，否則不要嘗試培養病毒。
將移液器中的液體新增到測試卡的樣品墊中時，請確保移液器的下部已滿且沒有氣體。 如果存在氣體，則將樣品排放回容器中; 通過擠壓上吸球將標本吸回試管中，並在必要時用新移液器更換。
9.所有移液器和洗脫液瓶均為一次性物品，禁止用於多個樣本。
10.當甲型H3和甲型H1是甲型流感病毒的主要傳播病毒時，建立了甲型流感病毒的執行特徵，其他甲型流感病毒出現後，其他甲型流感病毒的執行特性可能有所不同。
11.該檢測方法檢測禽流感的能力是使用培養的禽流感病毒確定的，對從感染H5N1或其他禽流感的人身上採集的標本進行的檢測的操作特徵尚不清楚。