離子交換色譜法它是一種根據電荷質量和數量的差異分離不同生物分子,並根據官能團的帶電性質分為陽離子交換樹脂和陰離子交換樹脂的色譜技術。 由於大多數生物分子都具有酸性基團或鹼性基團,並且可以通過調節緩衝液的pH值來改變其帶電的性質和數量,因此在生物分子與帶相反電荷的陰離子交換劑或陽離子交換劑結合後,改變流動相中的離子強度或pH值後,可以根據結合能力將生物分子從弱到強洗脫, 從而達到分離純化的目的。
本文以Borglon的離子色譜樹脂為例,介紹了離子色譜樹脂的應用以及不同型別樹脂的特點。
1、離子交換樹脂的應用
1.陽離子交換樹脂的應用:
單抗體、雙特異性抗體和抗體-藥物偶聯物 (ADC)。
疫苗和病毒樣顆粒。
病毒載體、外泌體、脂質奈米顆粒等
2.陰離子交換樹脂的應用:
單抗體、雙特異性抗體和抗體-藥物偶聯物 (ADC)。
酶、激素和血液製品。
疫苗、病毒載體、質粒和寡核苷酸。
在流通模式下具有出色的 DNA 清除率。
離子交換色譜的特點:
高解像度。 高容量。 高產。
應用範圍廣。
良好的物理和化學穩定性。
簡單的就地清潔。
二、離子交換樹脂的選擇
1.配體型別
按官能團的帶電性質分為陽離子交換和陰離子交換,按它們在溶液中的電離程度分為強離子交換基團和弱離子交換基團,常用的離子交換基團如下
強離子交換樹脂具有相同的離子交換容量,當pH值發生變化時,在很寬的範圍內充滿電,而弱離子交換樹脂的選擇性不同,但不適用於極端pH值。 在建立純化方法時,在確定離子交換模式後,首選強離子交換樹脂,當強離子交換樹脂無法達到所需的選擇性且未達到預期的解像度時,可以嘗試弱離子交換樹脂。
2.腳手架型別
基架之間的主要區別在於填料顆粒的大小,這提供了流速和解像度的差異。 根據支架的材料,博格龍離子色譜樹脂分為以下幾類:
由於填料耐受的最大流速不同,分離度和載樣量不同,各純化步驟的目的和要求也不同,捕獲階段的主要目的是分離、富集和穩定蛋白質,首先考慮載樣量和流速中間純化階段需要去除大量雜質,容量和分離度均應兼顧在精純階段去除與目標樣品非常相似的痕量雜質或物質需要盡可能高的解像度樹脂。 同時,樣品體積和純度在純化過程中變化很大,需要結合具體的純化步驟選擇合適的樹脂。
相關填料的具體引數資訊可以在博格隆官網檢視。
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