人白細胞介素 1 前體 ELISA 試劑盒的操作程式

1.實驗原理。

本實驗採用ELISA雙抗體夾心法，將人白細胞介素1前體特異性抗體包封，然後加入酶標記的二抗與捕獲的人白細胞介素1前體特異性結合，最終通過底物顯色反應將人白細胞介素1前體的含量轉化為光訊號， 根據光訊號的強度計算人白細胞介素1前體的含量。

2. 步驟。

1.微孔板和待測樣品的標準品製備：將標準品和待測樣品用稀釋劑稀釋並加入到微孔板的不同孔中。 注意：每孔新增相同量的樣品，避免氣泡。

2.封閉：將板在37下孵育1小時以封閉未結合的位點。

3.洗滌：清洗板以去除未結合的材料。

4.載入：將稀釋後的生物素化抗體加入相應的孔中，充分混合，以 37 倍孵育 1 小時。

5.洗滌：清洗板以去除未結合的材料。

6.加入酶：將稀釋的HRP標記的二抗加入相應的孔中，充分混合，並在37下孵育1小時。

7.洗滌：清洗板以去除未結合的材料。

8.顯色：加入底物溶液，在37°C孵育15-30分鐘。

9.停止：加入終止液以終止顯色反應。

10.檢測：用酶標儀檢測各孔的光密度值，並記錄資料。

3.注意事項。

1.在操作過程中，必須確保無菌操作，以防止汙染。

2.分配時，請確保新增相同的體積以避免產生氣泡。

3.孵育過程中應注意溫度控制，以免影響實驗結果。

4.顯色反應的時間應加以控制，以免影響光密度值的測定。