你知道的傳代培養程式是嗎？
傳代培養是通過將細胞從原始培養瓶中分離出來並將它們轉移到新培養瓶中進行培養來完成的。 這個過程也被稱為傳代培養細胞。 通過傳代培養，細胞擴增形成細胞系，便於細胞轉殖和儲存，為科學研究提供大量實驗材料。
特定傳代培養程式如下：
1.去除原始營養液：從燒瓶中倒入或取出舊培養液。
2.消化細胞：在燒瓶中加入少量混合胰蛋白酶溶液和EDTA溶液，以覆蓋燒瓶底部。 將燒瓶置於適當的溫度下（培養箱在37或室溫在25）進行消化。 觀察細胞的變化，一旦發現胞質回縮和細胞間隙增加，立即停止消化。
3.沖洗細胞：吸出消化物，加入少量Hanks溶液，輕輕轉動燒瓶，沖洗剩餘的消化物，然後加入培養基。 如果只用胰蛋白酶消化，可以吸出胰蛋白酶溶液，直接加入含血清的培養物，停止消化。
4.分離細胞：使用肘部移液器輕輕敲擊燒瓶壁上的細胞，反覆敲擊它們以脫離燒瓶壁並形成細胞懸浮液。 輕拍時要輕柔，以防止對細胞造成損害。
5.接種細胞：用載玻片計數後，將細胞接種到新燒瓶中，並置於 CO2 培養箱中進行固化。
6.更換培養基：根據細胞生長狀態和實驗要求，確定更換培養基的時間。 一般來說，每2-3天更換一次培養基。
7.一旦細胞覆蓋了容器的底部，它們就可以用於實驗，或者可以繼續進行遺傳和維持以擴大規模，或者可以用培養基代替它們。
傳代培養時應注意以下幾點：
1.控制細胞消化時間：時間太短會使細胞難以從燒瓶壁上分離，時間過長會導致細胞脫落受損。
2.控制消化液濃度：濃度過高時，應縮短消化時間;當濃度過低時，細胞消化時間相對較長。
初代培養成功後，隨著培養時間的延長和細胞的**，細胞之間會發生接觸抑制，生長速度會減慢甚至停滯。 此外，營養缺乏和代謝物積累也可能對細胞生長或毒性有害。 因此，需要傳代培養，在傳代培養細胞時，需要嚴格遵循傳代培養程式和注意事項，以獲得理想的實驗結果。