一、引言。
植物內源激素是植物產生的一類具有重要生理功能的低分子量有機化合物，在植物的生長發育和適應環境脅迫中起著重要作用。 近年來，隨著液相色譜-質譜技術的發展，植物內源性激素的檢測與分析取得了重要進展。 本文將介紹植物內源激素液相色譜-質譜的基本原理、方法和應用。
第二，基本原則。
液相色譜-質譜（LC/MS）是一種將液相色譜與質譜相結合，分離樣品，然後利用質譜對分離出的組分進行定性和定量分析的方法。 在植物內源性激素的檢測中，液相色譜-質譜法具有靈敏度高、解像度高、通量大等優點，可以同時檢測多種激素成分，提供準確的分子量資訊。
3. 方法論。 1.樣品處理。
對於植物內源激素的檢測，首先需要對植物樣品進行處理。 常用的方法包括提取、純化、濃縮等，以去除雜質，增加激素的濃度。 在提取過程中，根據激素的極性和溶解度，可以選擇合適的溶劑，如甲醇、乙醇等。 淨化過程通常包括萃取、柱層析等方法，以進一步去除雜質。 最後，執行濃縮步驟以將樣品濃度提高到可以進行LC/MS的水平。
2.液相色譜分離。
在液相色譜分離中，高效液相色譜（HPLC）通常用於通過具有不同孔徑的色譜柱分離樣品中的組分。 可以根據激素的極性、分子量和官能團選擇合適的色譜柱和流動相。 在分離過程中，不同的組分乙個接乙個地從色譜柱中流出，並通過檢測器進行檢測。
3.質譜分析。
在質譜分析中，通過液相色譜分離的組分被引入質譜儀中。 在質譜儀中，元件受到電子轟擊或化學電離，導致離子碎裂。 通過分析離子碎片的電荷質量比和豐度，可以確定組分的分子量和官能團等資訊。 同時，多級質譜法可用於對組分進行更深入的分析，提高鑑定的準確性。
四、實驗程式。
1.樣品提取過程。
1）取出超低溫保鮮樣品，在液氮中研磨至乾粉，稱取玻璃試管中鮮植物樣品適量
2）在玻璃試管中加入異丙醇-水-鹽酸混合提取物
3）加入8公升1g ml內標溶液，低溫振盪30分鐘
4）加入二氯甲烷，低溫振盪30分鐘
5）在低溫下以13000轉分離心5分鐘，除去有機相
6）避光，用氮氣乾燥有機相，用甲醇（01%甲酸）復溶;
7：離心4分鐘（13000g），取上清液022 m 膜，HPLC-MS MS。
注意：植物激素不穩定，整個操作過程中應將提取過程保持在4冰盒上。
2.標準溶液製備。
在甲醇中（01%甲酸）作為溶劑，梯度為01ng/ml，0.2ng/ml，0.5 ng ml、2 ng ml、5 ng ml、20 ng ml、50 ng ml、200 ng ml sa、ja、mesa標準溶液，加入終濃度為20 ng ml的內標溶液，在實際繪製標準曲線方程時消除線性異常值。
3.色譜質譜檢測條件。
資料採集系統主要包括高效液相色譜（HPLC）（Agilent 1290，串聯質譜，MS MS）（Applied Biosystems 6500 四極杆阱，4.）定性和定量分析。
質譜資料使用軟體Analyst進行處理。 下圖顯示了樣品的總離子電流（tic），即將每個時間點質譜中所有離子的強度相加並連續描繪，下圖顯示了植物激素檢測的總離子電流，橫坐標是植物激素檢測的保留時間（RT），縱坐標是離子電流強度（Count per Second， CPS）的離子檢測
總離子電流圖。
植物激素質子化或去質子化的選擇性反應監測條件（[m+h]+或[m-h]-）。
5.實驗結果與分析。
1.將顯示一些標準曲線。
MESA校準曲線。
SA校準曲線。
2.一些方法學驗證資料。
物質類別、名稱、線性範圍、方程、相關係數和權重係數。
第四，應用。 1.植物生長調節劑研究。
植物內源激素對植物的生長發育有重要影響，因此植物生長調節劑的研究對農業生產具有重要意義。 通過液相色譜-質譜法，可以對植物生長調節劑中的激素成分進行檢測和分析，了解其機理和作用，可為農業生產提供科學依據。
2.環境脅迫反應研究.
面對環境脅迫，植物會產生一系列生理生化變化，其中激素的合成和代謝是重要的調控途徑之一。 液相色譜-質譜聯用（LC-MS）可以檢測和分析植物在環境脅迫下產生的內源性激素變化，了解植物對環境脅迫的響應機制和適應策略。
3.農產品質量安全評價。
農產品中激素殘留問題一直是人們關注的焦點之一。 通過液相色譜-質譜聯用（LC-MS）可以對農產品中激素殘留量進行檢測分析，為農產品質量安全評價提供科學依據。 同時，該方法還可用於農藥殘留的檢測和分析，以確保農產品的安全和食品健康。
五、結論。 植物內源性激素液相色譜-質譜聯用是一種高靈敏度、高解像度、高通量的檢測方法，可以同時檢測多種激素成分，並提供準確的分子量資訊。 該方法在植物生長調節劑研究、環境脅迫響應研究和農產品質量安全評價等領域具有廣泛的應用前景。 隨著技術的不斷發展和改進，這種方法將在未來發揮更加重要的作用。