特異性蛋白質乙醯化測定是一種用於確定蛋白質是否以及在哪些位點經歷了乙醯化修飾的方法。 乙醯化是一種常見的蛋白質翻譯後修飾，通常發生在蛋白質的賴氨酸殘基上，對調控蛋白質功能、細胞訊號傳導、基因表達和疾病發病機制具有重要意義。 例如，組蛋白的乙醯化狀態直接影響染色質的結構和基因表達的調控。
乙醯化檢測通常依賴於特異性抗體，乙醯化蛋白可以通過蛋白質印跡、免疫螢光或質譜等技術進行鑑定和定量。 這些方法具有高度的特異性和靈敏度，可以精確檢測特定位點的乙醯化發生，從而揭示蛋白質功能的調控機制。
圖1乙醯化改性研究路線。
1.蛋白質印跡：
使用特異性抗體檢測蛋白質乙醯化。 首先用SDS-PAGE分離蛋白質，然後轉移到膜上，使用針對乙醯化位點的抗體進行檢測。 該方法可以定性地確定蛋白質是否被乙醯化，但不適合定位特定的乙醯化位點。
2.質譜 （MS）：
質譜法是測定蛋白質中乙醯化位點的標準。在對蛋白質樣品進行酶消化後，使用質譜法鑑定乙醯化賴氨酸殘基。 該方法可以提供有關乙醯化位點的精確資訊。
3.免疫共沉澱 （IP）：
使用針對乙醯化位點的抗體富集乙醯化蛋白，然後通過蛋白質印跡或質譜分析。 該方法適用於研究特定蛋白質的乙醯化狀態。
4.免疫螢光染色：
如果目的是觀察乙醯化蛋白在細胞中的定位，則可以使用免疫螢光染色。 這涉及使用針對乙醯化位點的特異性抗體，然後用螢光標記的二抗進行檢測。
5.酶聯免疫吸附測定 （ELISA）：
如果您需要量化乙醯化蛋白的水平，您可以使用 ELISA 方法。
選擇方法時，您需要考慮所需的資訊型別（定性或定量）、可用樣品量和實驗條件。 對於特定的乙醯化位點定位，質譜通常是首選方法。
特定蛋白質乙醯化水平的變化與多種疾病的發展有關，包括癌症、神經退行性疾病和心血管疾病。 因此，乙醯化檢測在疾病的早期診斷和監測中具有潛在的應用價值。 例如，在某些型別的癌症中，異常的乙醯化模式可以作為生物標誌物，幫助醫生制定更有效的策略。