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1.適用範圍
適用於食品生產車間空氣細菌數量、產品接觸面（直接或間接）、內包裝材料、人手表面等環境微生物的取樣檢測。
引用
GB 14881-2013 食品安全國家標準 食品生產通用衛生規範。
GB 15979-2002《一次性衛生用品衛生標準》。
gb 4789.1-2016年《食品安全國家標準食品微生物檢驗總則》。
gb 4789.2-2022年食品安全國家標準食品微生物學檢測菌落計數測定。
gb 4789.3-2016年食品安全國家標準食品微生物檢測大腸菌群計數。
裝置與材料
培養箱：36 1;
冰箱 0-4 ;
恆溫水浴 46 1 ;
電爐：可除錯;
平盤：盤底直徑9cm;
移液器：10毫公升，標有0以 1 ml 為單位縮放;
移液器：5毫公升，標有0以 1 ml 為單位縮放;
試管; 試管架; 消毒棉籤;
定時器; 移液器：容量為10ml;
滅菌規格板內徑為（10cm 10cm）;
酒精燈; 打火機;
酒精棉球; 玻璃蠟筆;
托盤。 營養瓊脂培養基; 乳糖膽鹽培養基; 曙紅蜜蘭瓊脂培養基;
生理鹽水，定量分裝在玻璃瓶和試管中，滅菌。
程式
4.1、生產車間空氣中細菌菌落的取樣培養。
4.1.1.取樣前，將配製好的營養瓊脂培養基36 1孵育24小時，除去汙染培養基，檢查是否存在汙染。
4.1.2.取樣時，將含有營養瓊脂培養基（直徑9cm）的培養皿放在取樣點（約桌子高度），開啟盤子蓋，將培養皿暴露在空氣中5min以上。 具體要求如下：
4.1.2.1、室內空氣中的室溫區域不得超過30m，對角線上應設定兩點，兩點距牆1m;
4.1.2.2、室內面積30m以上，內、中、外三點，周邊三點距牆1m。
4.1.3.將收集的培養基送至實驗室，使其孵育36 1孵育48 h，觀察結果，並計數平板上的菌落數。
.2. 接觸面的取樣和檢測
.2.1、裝置表面及內包裝材料表面：
將內徑為5厘公尺5厘公尺（或其他至少25厘公尺2）的滅菌板放在被測物體表面，用浸泡在滅菌鹽水溶液中的棉籤10次，然後剪掉棉籤接觸手的部分，將棉籤放入裝有10毫公升滅菌鹽水的取樣管中。
4.2.2.人力：
考生將手指併攏，用蘸有生理鹽水的棉籤從指尖到右手手指表面來回揉搓1010毫公升
4.2.3.菌落檢測總數：
無菌操作中，取已收集的各試樣管充分混合後取試樣溶液1ml，放入滅菌培養皿中，倒入營養瓊脂培養基，平行接種各試樣兩板，孵育36 1孵育48 h，計數平板上菌落數。
4.2.4. 大腸菌群計數檢測
4.2.4.1.初步發酵實驗。
收集的各型樣品瓶的試樣溶液充分混合後，接種3管十二烷基硫酸酯胰蛋白腖（LST）肉湯，每管接種1ml，置於36 1培養物中24 h，平行製備3個樣品;
4.2.4.1.1.對於氣體生產商，進行第一次發酵實驗。
4.2.4.1.2.如無產氣，繼續培養至48 2小時，如有產氣，進行**發酵實驗; 如果不產生氣體，則報告腸內大腸菌群陰性;
4.2.4.2**發酵實驗。
從帶接種環的產氣LST肉湯管中取出1環培養物，移植到亮綠色乳糖膽鹽肉湯（BGLB）管中，在36°C下1°C孵育48h，觀察產氣情況。 產氣者被算作大腸菌群陽性管。
4.2.4.3 份最可能大腸菌群數量 （MPN） 的報告。
按 42.4.2 確認了大腸菌群的 BCLB 陽性管數，並檢索了 MPN 表（見附錄 B）以報告每克 （ml） 樣品中大腸菌群的 MPN 值。
5 報告結果
查詢最可能的大腸菌群數 （MPN） 搜尋表。
其中：Y1 – 空氣中的菌落總數，CFU M3
Y2 – 食品接觸表面的菌落總數，CFU cm
Y3 – 每只手在人手表面的菌落總數 cfu。
Y4 - 食品接觸表面的大腸菌群（MPN M2），人手表面的大腸菌群 MPN 手。
a - 平板上的平均菌落數。
S1 – 板坯面積。
S2 – 取樣區域 cm
.生產環境衛生指標
7.記錄