細胞培養既複雜又複雜,簡單又簡單,細胞培養環境的維護、培養基的選擇和細胞的回收都至關重要,今天就來分享一下細胞培養需要具備哪些基本條件。
合適的細胞培養基
培養基是在體外維持細胞存活和生長的溶液,分為天然培養基和合成培養基。 現在實驗室一般使用合成培養基,合成培養基現在有DMEM、1640、IMDM、L15等,不同的細胞要用不同種類的培養基,如貼壁細胞多可以用DMEM培養,懸浮細胞多用1640培養。
血清的質量
合成培養基只能維持細胞存活,為了讓細胞生長繁殖,需要補充高質量的血清來增加營養。 血清是培養基中最重要的成分之一,含有細胞生長所需的多種生長因子和營養物質。
無菌、無毒的細胞培養環境
無菌無毒的培養環境是保證培養細胞存活的首要條件。 人體具有很強的免疫系統和解毒器官,因此當有毒物質侵入人體時,免疫系統和肝臟等器官可以抵抗並清除它們。 然而,細胞在體外培養時會失去抵抗力,一旦被汙染的細胞就會死亡,因此保持無菌無毒的環境是體外培養細胞最基本的條件。
恆定的細胞生長溫度
為了維持細胞增殖和生長,必須有合適的溫度。 目前,實驗室培養的細胞大多以哺乳動物細胞為主,如人、大鼠、小鼠、豬等,一般細胞培養溫度在37°C左右,此時細胞才能正常生長代謝。 當溫度較高時,高於39或更高會導致細胞損傷甚至死亡當溫度較低時,不低於0,雖然會影響細胞的新陳代謝和生長狀態,但不會導致細胞死亡,大部分細胞在溫度恢復後可以恢復其生長特性。 很少有實驗室有SF9、Hi-Five等昆蟲細胞,需要在28°C的環境下培養,具體培養溫度一定要注意細胞庫和相應的人工資訊。
合適的氣體環境
適宜的氣體環境也是細胞存活的條件之一,所需的氣體是O和Co,O產生能量使細胞生長增殖並合成各種所需成分,Co是細胞代謝產物和細胞所需的成分,其主要作用是維持培養基的pH值。 大多數培養基填充了95%的空氣和5%的一氧化碳,但L15培養基作為單獨設計的培養系統,需要直接在100%空氣條件下培養,引入5%的二氧化碳會導致培養基pH呈酸性,導致細胞變質或死亡。
細胞室消毒是一項非常重要的任務,因為它可以防止細胞培養中的汙染和交叉汙染。 在傳統的細胞室消毒方法中,最常用的是物理和化學消毒方法,下面我們將傳統的細胞室消毒方法與英聯生命科學的新型環保安全消毒方法進行對比。
物理消毒方法
物理消毒是通過物理手段殺死或去除微生物的方法。 最常見的物理消毒方法是紫外線消毒和高溫消毒。
1.紫外線消毒。
紫外線消毒是利用紫外線殺死或去除微生物。 紫外線消毒具有許多優點,例如快速,易於操作,並且不產生化學殘留物。 然而,紫外線消毒也有一些缺點。
首先,它只能殺死微生物的表面,而不能殺死微生物的內部。
其次,紫外光只能殺死直接暴露在紫外線下的微生物,因此細胞室的每個角落都需要暴露在紫外線下。
最後,紫外線消毒需要定期更換紫外線燈,這會增加成本。
2.高溫消毒。
熱療消毒是通過高溫殺死或去除微生物。 高溫消毒具有許多優點,例如能夠殺死微生物內部和沒有化學殘留物。 高溫消毒有以下缺點:
首先,高溫消毒需要使用高溫裝置,增加了成本。
其次,高溫消毒需要一定的時間,因此需要計畫和安排。
最後,高壓滅菌可能會對某些細胞培養物造成損害。
化學消毒方法
化學消毒是通過化學藥劑殺死或去除微生物的方法。 最常見的化學消毒方法是酒精消毒、過氧化氫消毒和氯消毒。
1.酒精消毒。
酒精消毒是利用酒精殺死或去除微生物。 酒精消毒具有許多優點,例如快速,易於操作等。 但是,酒精消毒最大的缺點是不能大面積使用,酒精只能殺死那些與酒精直接接觸的微生物,因此必須確保細胞室的每個角落都能接觸到酒精。 此外,酒精消毒可能會對某些細胞培養物造成損害。
2.雙氧水消毒。
過氧化氫消毒是用過氧化氫殺死或去除微生物。 過氧化氫消毒速度快,不產生化學殘留物。 但雙氧水消毒具有腐蝕性風險,這是最大的缺點,所有雙氧水消毒方法的選擇都必須考慮公司是否有能力降低腐蝕風險,如裝置單元使用情況、腐蝕性報告、霧化顆粒等。
3.氯消毒。
氯消毒是利用氯來殺死或去除微生物。 但是,氯消毒可能會產生需要排放的有害氣體。
綜上所述,傳統的細胞室消毒方法各有優缺點。 在選擇消毒方法時,需要根據實際情況進行選擇。 例如,如果需要快速消毒,可以選擇紫外線消毒或酒精消毒如果需要徹底消毒,可以選擇高溫消毒或氯消毒。 使用化學消毒方法時,要注意化學物質的濃度和接觸時間,以免損壞細胞培養物。 同時,需要定期檢查消毒裝置的效能,並進行維護和更換。
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