腦出血(ICH)小鼠模型中認知能力的測試方法。

Mondo 育兒 更新 2024-01-29

各種迷宮被廣泛用於測試動物的認知能力。 在腦出血齧齒動物模型的基礎研究中,莫里斯水迷宮、Y迷宮和新奇物體識別測試是最常用的方法之一。

1. 莫里斯水迷宮

莫里斯水迷宮(MWM)通常用於評估腦出血(ICH)後的空間習和記憶。 所需的裝置由乙個金屬池(直徑120厘公尺,高55厘公尺)組成,該金屬池分為四個象限,其中乙個象限放置乙個平台(直徑10厘公尺,高21厘公尺)用於動物逃生。 游泳池中的水位高於平台2厘公尺。 水溫保持在26 1°C。 諾達思動物運動軌跡跟蹤軟體用於記錄發現高原之前小鼠的延遲、頻率和游泳速度。 實驗分為兩部分:5天的訓練和6天的測試。 在每個訓練日以20-30分鐘的間隔訓練小鼠四次。 訓練時,應將滑鼠輕輕放在儀器上,面向牆壁。 平均而言,小鼠在 90 秒內找到平台並在平台上停留 15 秒。 如果滑鼠在 90 秒內找不到平台,輕輕引導滑鼠到平台,停留 15 秒,並將延遲記錄為 90 秒。 每次測試後,將小鼠用毛巾擦乾並放入加熱的籠子中。 第六天,平台被拆除,動物照常接受測試。 結果包括在平台的延遲和目標象限中花費的時間。 在訓練實驗中,較短的平台延遲可能與更好的空間習和記憶能力有關。 最初,ICH小鼠花費的時間明顯長於對照小鼠。 假手術組大鼠的逃逸潛伏期約為15秒)。對於假組小鼠,逃逸潛伏期約為 45 秒,目標遍歷大約需要 12 秒。 然而,在接下來的幾天裡,這個潛伏期應該會大大縮短,這表明空間記憶已經建立。

MWM 是測試記憶體使用最廣泛的方法之一。 在這個測試中,嗅覺線索或線索被消除。 實驗資料可以準確評估動物的空間位置感和方向感,特別是在空間定位方面。 但是,這種方法也有一些缺點。 游泳對動物是一種急性應激刺激,因此神經內分泌效應可能會影響實驗結果)。此外,水溫對動物活動有重大影響,因此保持水溫舒適至關重要。 最後,實驗結束後,應立即將實驗動物乾燥以預防疾病。

2. Y迷宮測試

y迷宮也經常用於測試空間記憶。 Y迷宮的裝置由三個臂組成(大鼠大小長40厘公尺,寬15厘公尺,高35厘公尺,小鼠大小30厘公尺長,寬10厘公尺,高17厘公尺),距中心點120°。 每個手臂的入口都用屏障封閉。 該測試在手術後 30 天進行。 測試時,開啟兩個隨機臂的障礙物。 其中乙個被選為起始臂,其餘仍有障礙物的臂被指定為新奇臂。 將動物放入起始臂中,讓它們自由探索兩個張開的手臂5分鐘。 然後將它們放回籠子裡休息。 2 小時後,移除所有三個障礙物,讓動物自由探索 5 分鐘。 記錄了三組的探索時間和每組的停留時間。 新奇手臂進入的百分比約為35%。 還有另一種計算方法。 首先,將迷宮的三個臂標記為 A、B 和 C。 然後開始錄製。 接下來,檢查所有手臂入口和備用記錄的數字。 最後,使用以下公式計算交變比:

交替率 =(交替次數 [手臂條目總數 – 2]) 100。

Y迷宮測試的優點是易於執行,裝置本身簡單方便。 需要表徵ICH模型中的靈敏度和可重複性。

3. 新奇物件識別測試

新奇物體識別測試 (NORT) 評估動物的記憶能力。 它需要三個物件,標記為 A、B 和 C,以及乙個可以容納物件和滑鼠的空地(47 厘公尺 26 厘公尺 20 厘公尺)。 物件A與物件B(綠色立方體,4厘公尺4厘公尺3厘公尺)相同,它們看起來與物件C(直徑5厘公尺的白色球體)不同,這是乙個新奇的東西。 大鼠的開放區域較大(60厘公尺,60厘公尺,50厘公尺)。 測試包括三個階段:第 1 天的習慣量、第 2 天的訓練和訓練後 1 小時的測試。 首先,在第1天,將小鼠置於空曠的場地中,並讓其探索10分鐘。 第二天,將受試者A和B放置在空曠的場地中,將小鼠放置在這兩個受試者之間,讓它們自由探索5分鐘。 然後,取出小鼠並將它們放回籠子裡休息。 此時,應用酒精清潔該部位以消除其他異味。 1小時後,用受試者C替換受試者B,並將滑鼠放回田間進行探索5分鐘。 記錄實驗體A和實驗體C的探索持續時間。 小鼠的運動由相機記錄並在以後進行分析。 在距離受試者 2 厘公尺以內用鼻子和/或前爪嗅聞或觸控被定義為探索性事件。 坐在或倚靠在物體上不被視為探索行為。 辨別指數的計算方式為:探索物件 c 的時間除以探索兩個物件所花費的總時間。 正常小鼠或大鼠的鑑別指數基線約為70%。

NORT易於執行,可以在短時間內完成(135)。 然而,由於分析需要花費大量時間,動物的探索行為有時很難分類,因此實驗資料採集非常耗時。 選擇合適的物體很困難,因為大小、形狀、材料和高度等因素可能會影響動物的喜好。

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