腦出血 (ICH) 小鼠模型中情緒行為的測試方法。

Mondo 健康 更新 2024-01-30

情緒行為測試目前常用於基礎神經學研究,但很少用於腦出血 (ICH) 研究。 情緒行為測試主要分為焦慮測試和抑鬱測試。 這些測試包括高架交叉迷宮、糖水偏好測試、懸浮尾部測試、開闊地測試、強迫游泳測試等。

1. 高架交叉迷宮

高架交叉迷宮 (EPM) 通常用於測試焦慮。 測試裝置由兩個臂組成,形狀像乙個十字架。 其中乙隻手臂有一堵牆,稱為閉合臂,而沒有牆的手臂稱為張開臂。 大鼠的迷宮為50厘公尺、10厘公尺、50厘公尺,老鼠的迷宮為45厘公尺、11厘公尺、22厘公尺和離地80厘公尺。

測試依賴於齧齒動物的探索性。 當放置在 EPM 的 ** 上時,它們自然會被驅使去檢查張開的手臂。 然而,齧齒動物的恐高症會阻礙探索,誘發焦慮。 該測試在 ICH 手術後 30 天進行。 在測試前兩小時,將滑鼠放入測試室以適應環境。 在測試開始時,將動物放在雙臂交叉的交叉點,頭部朝向張開的手臂。 動物可以自由探索迷宮5分鐘。 記錄在張開的手臂上花費的時間以及它進入張開的手臂的次數。 對於大鼠來說,進入張開臂的基線值約為3倍,在張開臂中花費的時間約佔總測試時間的30%。 對於小鼠,在張開的手臂中停留約20秒,然後進入張開的手臂約3次。

EPM 測試的優點是易於執行和記錄,並且不需要事先培訓。 然而,有時動物可能會從張開的手臂上掉下來並傷害自己,有些動物在手術後可能不願意移動到手臂上。

2.糖水偏好測試

糖水偏好測試(SPT)用於測試缺乏快樂和抑鬱的感覺。 該裝置由兩個瓶子組成,乙個裝有 1% 的糖水溶液,另乙個裝有純淨水。 該測試在手術後 18-21 天進行。 在測試開始時,將兩個重量相等的水瓶放入籠子中。 在測試結束時,對瓶子進行稱重並計算耗水量。 然後,通過以下公式計算對糖水的偏好:糖水消耗量(克)[純淨水消耗量(克)+糖水消耗量(克)。 正常大鼠和小鼠的基線分別約為70%和90%。 我們從文獻中知道,與對照組相比,抑鬱組對糖水的偏好較低。

SPT易於執行,不會對動物造成傷害,使其成為評估小鼠不快樂的最佳方法。 但是,它缺乏標準化的裝置。 在放入和取出籠子時,水分的流失不易控制,會影響實驗結果,因此目前,上海鑫軟公司改變了糖水偏好的測試方法,以測試小鼠的舔舐次數和舔舐時間,從而利用這兩個指標來評估小鼠的快感狀態。 研究人員必須在測試前控制動物的飲食。

3.明場試驗

曠場試驗 (OFT) 通常用於腦出血模型,以評估運動活動和類似焦慮的情緒。 測試裝置包括乙個開放的視野箱(50 厘公尺、50 厘公尺、38 厘公尺),底部有 25 個相等的正方形(中間有 9 個隔間,周圍有 16 個外部區域)和乙個計算機化的跟蹤系統。 與 EPM 測試類似,OFT 利用了齧齒動物的探索性。 正常動物花時間探索內區,而腦出血的動物往往留在外區以感覺更自在。 該測試在手術後第 30 天進行。 在測試當天,將動物提前2小時放置在測試室以適應環境。 在測試開始時,將動物放入盒子中10分鐘。 記錄在外部和內部區域花費的時間。 正常小鼠在基線時在外部區域花費約350秒,在內部區域花費約200秒。

OFT廣泛用於齧齒動物行為研究,但其結果容易受到許多因素的影響,例如時間、光照條件和室溫。

四、尾部試驗

尾懸試驗 (TST) 用於測試抑鬱症。 測試裝置由乙個吊箱(55 厘公尺、60 厘公尺、11 厘公尺)組成。5 厘公尺)、聚碳酸酯管(長 4 厘公尺,外徑 1.6 厘公尺,內徑 13厘公尺,用於套上老鼠的尾巴,以防止老鼠抓住尾巴攀爬)並纏繞膠帶。該測試在手術後第 21 天進行。 為了準備測試,在動物的尾巴上粘上一條 17 厘公尺長的膠帶(尾巴末端外應留 2-3 公釐的膠帶)。 膠帶的自由端掛在橫桿上。 倒置的姿勢會導致動物掙扎。 當他們意識到掙扎無法改變他們的處境時,他們就會停止前進。 將小鼠懸浮7分鐘,並記錄最後6分鐘的休息時間。 測試後,應將滑鼠放回籠子中,並輕輕取下尾巴上的膠帶。 根據參考資料,對照組在 150 分鐘內的不動時間為 300-6 秒。

TST易於執行。 該測試的侷限性在於它不適合大鼠,因為它們的體重較重。 因此,他們依靠尾巴來支撐體重並感到疼痛(這可能導致尾巴骨折)。

5.強迫游泳測試

強迫游泳測試 (FST) 是一種齧齒動物行為測試,由 Porsolt 等人於 1978 年首次描述。 該測試被用作抗抑鬱藥物臨床療效的模型,並廣泛用於分析抑鬱樣行為。

在該測試中,將動物置於裝滿水的容器中(對於大鼠,高50厘公尺,直徑20厘公尺;對於小鼠,高20厘公尺,直徑22厘公尺)。對大鼠的試驗包括兩個相隔24小時的階段:第乙個是**試驗階段(15分鐘),第二個是試驗階段(5分鐘)。 小鼠試驗包括持續6分鐘的階段,分為兩部分;** 測試(前 2 分鐘)用作測試的習慣期(最後 4 分鐘)。 記錄靜止、游泳和攀爬行為。 參考資料顯示,正常小鼠的平均休息時間為120-140秒,平均攀爬時間為20-40秒,平均游泳時間為70-90秒。 正常大鼠的基線是125-150秒的休息時間,75-100秒的攀爬時間和200-225秒的游泳時間。 已經證明,動物在抑鬱後在FST中表現出增加的休息時間,並且各種抗抑鬱藥物能夠通過增加游泳和/或攀爬時間來減少休息時間。

FST價格低廉,快速可靠。 它被廣泛用於篩查抗抑鬱藥。 然而,它缺乏結構有效性和特異性。 實驗動物在被迫游泳時會遭受行為上的絕望。 此外,FST的乙個關鍵侷限性是重新測試會導致實驗結果不準確,因此動物一生中只能測試一次。 最後,與其他測試類似,FST中的動物行為受生物學因素的影響,包括FST前處理、方案、途徑、劑量和藥物型別、實驗設計和實驗室環境因素。

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