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產品&功能：
由我們公司開發腸桿菌是一種通用的染料PCR試劑盒，具有以下特點：
1.開箱即用，使用者只需提供病毒樣本。
2.根據腸桿菌屬的通用保守序列設計的特異性引物，與相關病毒無交叉反應性。
3.靈敏度可達反應的數百個拷貝。
4.單管PCR檢測，避免後續汙染。
5.該試劑盒足以進行 50 次 20 L 反應。
運輸和儲存：低溫運輸，-20儲存，有效期一年。
自備試劑：DNA 模板，10 ROX（取決於型號，請參閱如何使用）。
如何使用 1稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝L的6倍10倍稀釋液為例）。
1.注意：由於標準品的濃度非常高，以下稀釋必須在單獨的區域進行，並且不得汙染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加本品的穩定性，避免傳染性病原體的傳播，本品不提供活體樣品作為陽性對照，僅提供可直接作為陽性對照的DNA片段。
2.標記 6 個離心管，7、6、5、4、3、2。
3.加入 45 L 螢光 PCR 特異性模板稀釋液，帶有核心尖端（最好使用核心尖端，如下同）。
4.將 5 l 的 1 10e8 拷貝的陽性對照加入試管 7 中 1 分鐘，以獲得 1 10e7 拷貝的陽性對照。 放在冰上。
5.改變移液器吸頭，向試管6中加入5公升1 10e7拷貝的陽性對照（在上一步中稀釋），並充分**1分鐘以獲得1 10E6拷貝的陽性對照。 放在冰上。
6.更換移液器吸頭，向5號管中加入5 L 1 10E6陽性對照拷貝1分鐘，得到1 10E5陽性對照拷貝。 放在冰上。
7.重複上述步驟，直到獲得 6 次稀釋的陽性對照。 放在冰上。
2.樣品DNA的製備：
8.如果有 n 個樣品，則必須設定 n+2 次提取，額外的一次是 PC（樣品製備陽性對照），乙個是 NC（樣品製備陰性對照）。 PC可用10 L的PCR陽性對照4號（1 10e4拷貝L，10 L相當於10,000拷貝）或5號（1 10E5拷貝L，10 L相當於100,000拷貝）加一定量的水作為PC，使總體積與每次製劑所需體積相同。 此外，水用作NC。 如果每次製備需要 200 L 樣品，則 PC 和 NC 的體積也必須為 200 L。
9.使用所選方法純化 DNA 樣品，該試劑盒與市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒相容。 該公司的單管病毒DNAout或其公升級的柱病毒DNAout也可以作為選項購買。 該試劑盒隨附 15 份免費的病毒 DNAOUT 體細胞。
3.設定qPCR反應（20L系統，在樣品製備室進行）：
10.如果僅進行 1 次重複，則標記 n+9 個 PCR 管，其中 n+2 表示上一步的 n+2 個樣品，1 個表示陰性 PCR 對照，6 個表示陽性 PCR 對照。 如果進行 2-3 次重複，則將反應設定的數量增加 2 或 3 倍。
11.如下表所示，將成分新增到標記管中（此表中僅列出乙個重複。 設定陽性對照 樣品管和陰性對照後，陽性對照樣品應等到所有試管都蓋好並儲存。
稍後新增）。
注意：僅 ABI 和 7900 儀器需要 ROX，其他螢光 PCR 儀器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、Rotorgene3000、Rotorgene 6000 和 Lightcycler480）不需要 ROX，只需用水代替即可。
12.蓋上蓋子上機，按照以下引數進行PCR（具體PCR引數可根據不同儀器進行優化）。
13.資料採集。
操作按照所用儀器的推薦流程進行。 本產品所含螢光染料對非結合DNA的最大吸收光譜為471nm，對結合DNA的最大吸收光譜為500nm，對結合DNA的最大吸收光譜為530nm。 訊號採集可以在復位或延伸步驟中設定。
4. 資料處理：
14.若採用本試劑盒定量檢測，以陽性對照濃度的對數值為橫軸，以CT值為縱軸，繪製標準曲線。 然後使用待測樣品的CT值從標準曲線計算樣品DNA濃度的log值，然後計算其濃度。
15.如果該試劑盒用於定性測試，僅判斷陽性或陰性，則陰性對照 CT 必須大於或等於 40。 陽性對照必須具有螢光對數增加，具有典型的擴增曲線，並且CT值應小於或等於30。 待檢測樣本CT大於等於40時為陰性，CT小於等於35時為陽性。 如果在 35-40 之間，請重複一次。 重複實驗的CT值大於等於40時為負值，小於40時為正值。
它僅用於科學研究，不用於臨床診斷！所有產品僅供科研使用，不得用於其他目的。