僅供體外研究使用，不用於臨床診斷！
牛雙載蛋白 （AMPH） ELISA 試劑盒。
牛雙載蛋白 （AMPH） ELISA 試劑盒。
[樣品處理和要求]。
1.血清：將收集在血清分離管中的全血標本在室溫下放置2小時或4過夜，然後以1000g離心20分鐘，上清液可在-20或-80°下取或儲存，但應避免反覆凍融。
2.血漿：收集以EDTA或肝素為抗凝劑的標本，收集後30分鐘內以2-8 1000 g離心標本15分鐘，取上清液檢測，或將上清液儲存在-20或-80，但避免反覆凍融。
3.組織勻漿：使用預冷的PBS（001m, ph=7.4）沖洗組織，除去殘留的血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重後將組織切碎。將切碎的組織與相應體積的PBS進行比較（一般按1：9的重量體積比，例如，1g組織樣品對應9ml的PBS，可根據實驗需要適當調整比容，並應做好記錄。 建議將蛋白酶抑制劑新增到PBS中）到玻璃均質器中，並在冰上研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以將勻漿超聲處理或反覆凍融。 將勻漿以5000g離心5 10分鐘後，取上清液進行檢測。
4.細胞培養上清液或其他生物標本：以1000g離心20分鐘，取上清液進行檢測，或將上清液在-20或-80下儲存，但避免反覆凍融。
注意：標本溶血會影響後續檢測結果，因此溶血標本不宜進行本檢測。
牛雙載蛋白 （AMPH） ELISA 試劑盒。
[試劑製備]。
實驗程式應從冷藏環境中取出，在室溫下平衡後方可使用。
20洗滌緩衝液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即20洗滌緩衝液的1份加上蒸餾水的19份。
操作步驟】1、室溫平衡20min後，從鋁箔袋中取出所需的板條，用自封袋將剩餘的板條密封後放回原處 4.
2、設定標準孔和樣孔，每標準孔加入不同濃度的標準品50 L
3.將50公升待測樣品加入樣品孔中不新增空白孔。
4.除空白孔外，在標準孔和樣品孔各孔中加入100 L辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體，用密封膜密封反應孔，反應孔在37水浴或培養箱中孵育60min。
5.倒掉液體，在吸水紙上拍幹，每孔裝滿洗滌液（350公升），靜置1min，甩掉洗滌液，在吸水紙上拍幹，重複洗盤5次（也可以用洗衣機洗盤）。
6.向每個孔中加入50 L底物A和50 L底物B，並在黑暗中孵育37分鐘。
7.向每孔中加入50 L終止液，在15min內以450nm的波長測量各孔的OD值。
牛雙載蛋白 （AMPH） ELISA 試劑盒。
[程式]。
1.標準品稀釋：該試劑盒提供主要標準品，可根據隨附說明中的圖表在小試管中稀釋。
2.填充：分別設定空白孔（空白對照孔不新增樣品和酶標記試劑，其餘步驟相同）、標準孔、待測樣品孔。 精密在微孔板上加入標準品50 l，向樣品孔中加入樣品稀釋液40 l，然後加入待測樣品10 l（樣品最終稀釋度為5倍）。 盡量將樣品加入微孔板孔底部，盡量不要接觸孔壁，輕輕搖晃混合。
3.孵育：用密封膜密封板，孵育後放置37分鐘。
4.製備方法：用蒸餾水將30倍濃縮洗滌液稀釋30倍，備用。
5.洗滌：小心取下密封膜，棄去液體，甩乾，將洗滌液裝滿每個孔，靜置30次後丟棄，重複5次，拍乾。
6.新增酶：每孔加入 50 l 酶標記試劑，空白孔除外。
7.孵育：操作與3相同。
8.洗滌：同5。
9.顯色：向每孔中加入顯色劑A50 L，再加入顯色劑B50 L，輕輕混合，37避光10分鐘。
10.終止：每孔加入 50 l 終止液以終止反應（此時藍色變為黃色）。
11.測定：依次測量各孔的吸光度（OD值），對空白孔進行零點調整，波長為450nm。 測定應在加入終止溶液後15分鐘內進行。
牛雙載蛋白 （AMPH） ELISA 試劑盒。
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[售後]。
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