免疫系統就像身體的守護者，默默地守護著我們的健康。 組成這個護送團隊的免疫細胞負責清除細菌、病毒和異物另一方面，它是“人體最好的醫生”，通過消除體內的衰老細胞和突變細胞，為健康奠定基礎。
圖1免疫系統的成員。
NK細胞、T細胞、B細胞等都是免疫系統的成員，我們在前面的流式細胞術課中介紹過th1/th2/th17跟treg今天就給大家簡單介紹一下單元格的選擇及其指標NK細胞並講解其檢測指標和案例分析。
相關閱讀： elabscience流式細胞術教室th1 th2 th17細胞介紹和指標選擇 elabscience流式細胞術教室 |TREG細胞簡介和指標選擇
NK細胞簡介
NK細胞是淋巴細胞的成員，又稱自然殺傷細胞（NK細胞），是體內重要的免疫細胞。 NK細胞是形態學上較大的顆粒狀淋巴細胞，是除T細胞和B細胞之外的第三大類淋巴細胞，約佔血液中所有免疫細胞（白細胞）的15%，屬於先天免疫系統的核心細胞，主要分布在外周血、肝臟和脾臟中。 它它可以在不進行抗原預敏的情況下破壞靶細胞，並且它非mhc限制性，反應速度快，可以在免疫應答的早期階段發揮作用
圖2NK細胞示意圖。
NK細胞是體內最重要的“戰士”，負責殺死衰老、病毒感染、腫瘤等異常細胞。 此外，在面對癌細胞時，NK細胞不需要其他細胞的活化和致敏作用來直接識別和殺死癌細胞，因此它們也被稱為人體對抗癌症的第一道防線。 如果NK細胞數量減少或功能下降，患腫瘤疾病的幾率就會明顯增加。
與同樣屬於同一家族的中性粒細胞、巨噬細胞等相比，其細菌和病毒的範圍更廣
與獲得性免疫細胞T細胞相反，它是在預測“敵人”的入侵。它的反應更靈敏，並且具有更廣泛的“殺戮”。它不僅限於殺傷腫瘤細胞，而且在抗病毒和抗衰老方面也取得了成就。
NK細胞的發育和分類
目前主流NK細胞開發模式認為，骨髓中 CD34 + CD45Ra+ 造血祖細胞 （HPC） 中的 NK 細胞**。在骨髓中，NK細胞通過共同淋巴祖細胞（CLPS）和NK細胞前體（NNKPs）從HPC發育而來，然後遷移到外周血（常規NK細胞）或組織駐留NK細胞（TRNK細胞）。
TRNK細胞的分化發生在不同的組織部位，包括肺、胸腺、肝臟、子宮、皮下脂肪組織和腎臟。 在這些位點，NK細胞具有不同的表型特徵和功能，構成了NK細胞在不同成熟階段的週期。 除了不同的組織型別，即使在同乙個器官和同乙個組織中，NK細胞也是高度異質的
圖3NK細胞的發育和亞群。
NK細胞通常被定義為CD3、CD56+細胞，通常根據表面蛋白CD56和CD16的相對表達分為兩類：cd56hicd16-（免疫調節、細胞因子產生）和cd56lowcd16+（細胞毒性）。 其中，CD56lowCD16+佔所有NK細胞的90%，CD56hiCD16-low僅佔10%左右。
NK細胞檢測指標選擇及案例
如何選擇檢測NK細胞的指示劑？根據以往的實驗經驗，為大家做如下總結：
human：cd3-cd56+cd16+
mouse：cd3-cd49b+/nk1.1+
人外周血NK細胞檢測一例
人NK細胞在發育過程中表達特異性指示劑CD56，一些NK細胞在發育結束時也表達FC RIIIA（CD16）和CD57。 外周血或其他未純化的NK細胞樣本應進行CD3檢測，以排除特殊型別的T細胞NKT（CD3+CD56+）。 人外周血NK細胞的結果如下圖所示
圖4流式細胞術檢測人外周血NK細胞的結果。
檢測NK細胞的標準是：cd3-cd16+cd56+
CD16 和 CD56 最好具有同型對照，其他指標由於聚類明顯，可以省略。
建議對人外周血樣本進行CD45染色通過CD45和SSC，它有利於淋巴細胞門控。CD45可作為單染色管使用，低速，可設定閾值。
C57BL 6小鼠Nk細胞檢測案例
CD49b 和 NK11是小鼠NK細胞鑑定的兩種標誌物，實驗時需根據小鼠品系選擇其中一種。 例如，CD49B（DX5）用於BALB C小鼠，NK1用於C57BL6小鼠1. 分析時間圈 CD3-CD49B+ 或 CD3-NK11+。C57BL6小鼠NK細胞的結果如下圖所示
圖5C57BL6小鼠NK細胞測定的流式細胞術結果。
外周血樣本直接增加CD45指數淋巴細胞群由 CD45 和 SSC 圈出
C57BL6小鼠NK細胞的檢測標準是：cd3-nk1.1+
實驗關鍵因素是紅細胞裂解，紅細胞裂解過多或不充分都會導致淋巴細胞群分割不明顯。
NK細胞檢測流式細胞術抗體推薦
NK細胞檢測流式細胞術抗體推薦
溫馨提示：對於上述**中提到的產品，搜尋“elabscience”訪問官網，搜尋貨號即可檢視產品詳情。