近年來,在各方的努力下,細胞STR的鑑定逐漸得到重視。 許多實驗室已開始定期對培養的細胞系進行STR表徵。 然而,細胞的定期支原體檢測仍然被忽視,大多數實驗室只在懷疑細胞被支原體汙染時才進行支原體檢測,此時細胞腔中的所有細胞都可能被不同程度的支原體汙染!
支原體,也稱為支原體,是迄今為止發現的最小和最簡單的原核生物。 大約30%-60%的細胞培養物在細胞培養過程中被支原體汙染。 由於支原體的尺寸非常小,直徑僅為 01-0.3 m,加上形態多變,有球形、棒狀、絲狀、支枝狀等形式,因此實驗室和生物製品廠在細胞培養過程中容易受到支原體汙染。
支原體形態學)。
細胞的支原體汙染不僅會影響細胞的生長狀態和形態,還會影響細胞的正常代謝和功能,如細胞中蛋白質、DNA和RNA的合成紊亂,影響細胞訊號傳導,染色體異常等。 如果結果是在支原體陽性細胞中獲得的,實驗資料肯定會影響結論的有效性。
細胞被支原體汙染)。
更重要的是,一些主流的SCI期刊(如IJC)和細胞相關組織(如ICLAC)對細胞中支原體的檢測做出了明確的要求,無論是在日常細胞培養中還是在投稿前,支原體檢測都應與細胞的STR鑑定同時進行。
ICLAC的指導檔案“細胞系認證是日常細胞培養實踐的一部分”,其中指出:“所有細胞系都應進行常見微生物汙染檢測,如支原體。 還需要檢測病毒汙染,具體取決於細胞系型別和您的具體應用。 ”
拉克拉克)。
IJC的作者指南指出,“證明所有實驗均使用無支原體細胞進行的宣告”指出,“[在提交時]提供了所有實驗均使用無支原體細胞進行的宣告。 此外,IJC編輯部發表的一篇文章也建議:“如果細胞系是從二級**(例如,從事基礎研究的同行)獲得的,則該細胞系應在不使用抗生素的情況下分離培養,直到通過STR分型確認細胞身份;同時,還應檢測細胞系的無菌性和支原體。 ”
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nicole y souren et al., 2022)
因此,與STR鑑定一樣,定期支原體檢測應是實驗室日常細胞培養工作的重要組成部分
目前,支原體檢測的主流方法是PCR。 蘇州健達的支原體檢測試劑盒是基於PCR的試劑盒,可檢測528種支原體,保證了高特異性,優化了PCR廣譜差的問題。
參考資料: 1www.jsdna.org/cell
3.**cell line authentication part of everyday cell culture practice. iclac.
4.nicole y souren et al., cell line authentication: a necessity for reproducible biomedical research. embo j.2022 jul 18;41(14):e111307.
蘇州基因檢測生物技術(GTB)採用STR分型技術檢測出21個人細胞位點和小鼠細胞19個位點(18個小鼠位點+1個人位點TH01),採用3130XL基因分析儀進行毛細管電泳。對照ATCC等資料庫,出具權威英文報告,為全國近500家科研機構(高校、科研院所、醫院、企業)提供優質服務,多家單位利用建達細胞株鑑定服務在高水平期刊(如臨床癌症研究、Nature Commnications、 Int J 癌症等)。
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