介質無法正常凝固的原因及解決方法

1. 瓊脂知識

瓊脂，也被稱為瓊脂或冷凍粉，也被稱為“海藻”，因為它最初是從日本海藻中提取的。 成品瓊脂為白色或淡黃色粉末或細條狀，主要由複雜的大分子多醣組成。 其水解產物由40%D-半乳糖、3%硫酸鹽和2%丙酮酸組成，實際上，它是瓊脂膠和瓊脂糖兩種成分的混合物。 瓊脂糖是瓊脂糖的硫酸酯，主要依靠氫鍵的引力形成網路結構。 因此，瓊脂糖凝膠的穩定性略低於通過交聯化學鍵形成網路結構的凝結劑。

瓊脂可溶於熱水，但不溶於冷水，因此在製備培養基時需要煮沸瓊脂。 隨著溫度的公升高，瓊脂逐漸溶解，當溫度降至40時開始凝固。 在製備培養基時，應注意的是，由於不同地方生產的瓊脂質量不同，相同濃度的瓊脂水溶液在凝固後硬度、透明度和顏色會有所不同。 劣質瓊脂不僅凝固性差，而且攜帶大量雜質。

2. 瓊脂凝固性知識

瓊脂作為培養基的凝固劑，不僅與瓊脂本身的質量有關，還受滅菌溫度、滅菌時間、瓊脂用量和pH值的影響。

1）0.7%～0.8%的瓊脂水溶液冷卻後會凝固良好，常用的微生物培養基瓊脂用量趨於基本穩定，條狀瓊脂通常為2%左右，粉狀瓊脂為1%5%。

2）培養基的pH值對瓊脂的凝固有很大影響，是瓊脂能否在正常濃度範圍內凝固的關鍵因素30

3） 在 430 （4）當製備的固體培養基pH值低於3時在44時，其凝固會受到滅菌溫度、滅菌時間、瓊脂量和pH值的影響。 其中，滅菌溫度和滅菌時間與瓊脂凝固呈負相關，瓊脂用量和pH值與瓊脂凝固呈正相關。 然而，在這些因素中，瓊脂量的影響不是很大，因此在這類培養基的滅菌過程中，應重點關注滅菌溫度、滅菌時間和pH值。 使用較低的滅菌溫度、較短的滅菌時間、適當提高培養基的pH值可以顯著改善瓊脂的凝固。 pH值低（40）、pH值是影響凝固等級的主要因素。

滅菌培養基的分層。