該試劑盒僅用於體外研究，不用於臨床診斷。
該試劑盒用於體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿和相關液體樣品中的人胃脂肪酶（LIPF）含量。
有效期：6個月。
儲存條件：2-8
試劑盒組成。
備註：1（96噸48噸）開啟包裝後，請及時檢查所有物品是否齊全。
2.標準品的濃度為pg ml
3.在對大量正常試樣進行檢測後，試樣的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測範圍內，實驗時可直接取樣並載入50 L試樣。 當某些樣品值超過最大標準濃度時，可以在實驗前用樣品稀釋劑適當稀釋樣品。
測試前準備：
1.請提前 20 分鐘將套件從冰箱中取出並平衡至室溫。
2.從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能會結晶，這是正常的; 置於室溫下，輕輕搖晃，待結晶完全溶解後再製備洗滌液。 20ml濃縮洗滌液可用蒸餾水或去離子水稀釋，制得400ml工作濃縮洗滌液，未用完的可放回4
3.20 洗滌緩衝液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 20 份洗滌緩衝液的 1 份加 19 份蒸餾水。
實驗原理：該試劑盒採用雙抗體一步夾心酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。 將標本、標準品和 HRP 標記的檢測抗體加入預包被人胃脂肪酶 （LIPF） 捕獲抗體的包被微孔中，孵育並徹底洗滌。 顏色是用底物TMB形成的，TMB通過過氧化物酶轉化為藍色，並通過酸轉化為最終的黃色。 顏色的深淺與樣品中的人胃脂肪酶（LIPF）呈正相關。 用酶標儀在450nm的波長下測量吸光度（OD值）並計算樣品濃度。
為實驗準備自己的測試裝置：
1.酶標儀 （450 nm）。
2.高精度點膠器和吸頭：05-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
3.37孵化器。
4.蒸餾水或去離子水。
樣品處理和要求：
1.血清：將血清分離器中採集的全血標本在室溫下放置2小時或4過夜，然後以1000g離心20分鐘，上清液可在-20或-80下取或儲存，但應避免反覆凍融迴圈。
2.血漿：以EDTA或肝素為抗凝劑收集標本，在收集後30分鐘內以2-8 1000 g離心標本15分鐘，取上清液檢測，或將上清液儲存在-20或-80，但避免反覆凍融迴圈。
3.組織勻漿：用預冷的 PBS 勻漿 （001m,ph=7.4）沖洗組織，除去殘留的血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重後將組織撕碎。將切碎的組織與相應的PBS體積進行比較（一般按1：9的重量體積比，例如，1g的組織樣品對應9ml的PBS，可根據實驗需要適當調整比容，並應做記錄。 建議將蛋白酶抑制劑新增到PBS）中，並在玻璃勻漿機上研磨均勻。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿進行超聲處理，或反覆凍融。 最後將勻漿以5000g離心5分鐘，持續10分鐘，取上清液檢測。
4.細胞培養上清液：以1000g離心20分鐘，取出上清液進行檢測，或將上清液儲存在-20或-80，但避免反覆凍融迴圈。
5.其他生物標本：離心1000g，取上清液檢測。
6.樣品外觀：樣品應清澈透明，懸浮物應離心除去。
7.樣品儲存：若樣品在1週內採集檢測，可儲存在4個，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，冷凍在-20（1個月內檢測），或-80（6個月內檢測），避免反覆凍融， 並且標本的溶血會影響最終的檢測結果，因此該試驗不宜對溶血標本進行檢測。
注：1嚴格按照規定的時間和溫度進行孵育，以保證準確的結果。 所有試劑在使用前必須達到室溫 20-25。 試劑使用後立即冷藏。
2.不正確的洗板會導致結果不準確。 在新增底物之前，確保從孔中吸出盡可能多的液體。 在孵育過程中不要讓微孔變乾。
3.消除板底部殘留的液體和指印，否則會影響OD值。
4.底物顯色溶液應為無色或顏色很淺，不應使用已變藍的底物溶液。
5.避免試劑和標本的交叉汙染，這可能導致錯誤的結果。
6.在儲存和孵育過程中避免直接暴露在強光下。
7.在開啟密封袋之前平衡至室溫，以防止水滴凝結在冷板條上。
8.任何反應試劑都不應與漂白溶劑或漂白溶劑釋放的強氣體接觸。 任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9.過期產品不能使用。
10.如果存在疾病傳播的風險，應管理所有樣本，並應按照規定的程式處理樣本和檢測裝置。
操作步驟： 1 室溫平衡60min後，從鋁箔袋中取出所需的板條，用自封袋密封剩餘的板條放回原處 4.
2.設定標準孔和樣品孔，每個標準孔中加入50公升不同濃度的標準品。
3.在樣品孔a中加入50L待測樣品; 不新增空白孔。
4 除空白孔外，標準孔和樣品孔各孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100 L，反應孔用密封膜密封，在水浴或培養箱中孵育37年60 min。
5 棄去液體，在吸水紙上拍幹，用洗滌液（350 l）填充每個孔，靜置 1 分鐘，甩掉洗滌液，在吸水紙上拍幹，重複洗盤 5 次（也可以使用洗板機洗板）。
6 向每個孔中加入 50 L 底物 A 和 50 L B 溶液，並在 37 暗中孵育 15 分鐘。
7 向每個孔中加入 50 L 終止溶液，並在 15 分鐘內測量每個孔在 450 nm 波長處的 OD 值。
實驗結果計算：
繪製標準曲線：在excel工作表中，以標準品的濃度為橫坐標，以相應的OD值為縱坐標，繪製標準的線性回歸曲線，根據曲線方程計算每個樣品的濃度值。
效能： 1檢測範圍：25 pg ml 800 pg ml。
2.靈敏度：最低檢測濃度小於10 pg/ml。
3.特異性：與其他可溶性結構類似物無交叉反應性。
4.重複性：板內變異係數小於10%，板間變異係數小於15%。
技術提示：
1.混合或重溶蛋白質溶液時，盡量避免起泡。
2.為避免交叉感染，在配置不同濃度的標準品、載入樣品、新增不同試劑時，需要更換移液器吸頭。 此外，對於不同的試劑，請使用不同的移液器。
3.在每次孵育期間正確使用密封凝膠將確保結果的準確性。
4.混合顯色基質在鍍層前應為無色，並應避光儲存; 如果放置微孔板，它將從顏色變為不同深度的藍色。
5.液體的定向順序應與顯色底物的順序相同; 加入終止液後，孔內顏色由藍色變為黃色; 如果井內有綠色，則說明井內液體未混合; 充分混合。
說明：1由於現有條件和科學技術水平，無法對所有供應商提供的所有原材料進行全面鑑定和分析，本產品可能存在一定的質量和技術風險。
2.最終的實驗結果與試劑的有效性、實驗人員的相關操作以及當時的實驗環境密切相關，因此請務必準備足夠的標本備份。
3.同一產品不同批次之間可能略有差異，如：檢測限、靈敏度和顯色時間等，請按照套件中的說明進行實驗操作，**說明書電子版僅供參考。
4.只有使用與該試劑盒相關的所有試劑才能保證檢測效果，其他廠家的產品不能混用。 只有嚴格遵守該試劑盒的實驗說明，才能獲得最佳結果。