非洲豬瘟病毒抗體檢測試劑盒（夾心法）使用說明書
名字：非洲豬瘟病毒抗體檢測試劑盒
有可能的用途：該試劑盒用於檢測豬血清中的非洲豬瘟病毒（ASFV）抗體。
實驗原理：
非洲豬瘟病毒抗體檢測試劑盒率先採用雙抗原夾心法確定樣本是否含有非洲豬瘟病毒（ASFV）抗體。 將重組ASFV抗原包被微孔板製成固定相，將樣品加入塗有抗原的微孔中，然後與HRP標記的ASFV抗原結合，形成抗原-抗體-酶標記的抗原複合物，洗滌後用底物TMB著色。 TMB被HRP酶催化成藍色，最終被酸催化成黃色。 顏色的深淺與樣品中非洲豬瘟病毒（ASFV）抗體的數量呈正相關。 用酶標儀在450nm的波長下測量吸光度（OD值），並計算OD值以確定樣品是否含有非洲豬瘟病毒（ASFV）抗體。
套件組成：
試劑製備：
1.1.洗滌液的配製：混合均勻後，將20濃縮洗滌液在去離子水中稀釋20倍。
2.1.樣品稀釋劑的製備：取混合後的20倍樣品稀釋液，在去離子水中稀釋20倍。
3.樣品製備：使用前用 1 次樣品稀釋液稀釋樣品 10 倍（建議 20 μl 血清，180 μl 樣品稀釋）。
4.底物溶液（即用型）的製備：使用前，按1：1的體積比將顯色溶液A與顯色溶液B混合，避光儲存。
程式：
使用前將試劑盒的所有組分和待測試樣品平衡至室溫。
1.根據上述試劑製備專案，配製各種試劑、陽性和陰性對照品及待檢測樣品;
2.計算檢測樣品所需的酶標記，將酶標記物從鋁箔袋中取出，將剩餘的酶標記物放回鋁箔袋中，密封袋口，低溫儲存;
3.樣品孵育：分別加入陰性對照、陽性對照和待測樣品，並作記錄，100公升孔，混勻; 然後將酶標記的抗原加入微孔板中，50 l孔，混合孔，然後層壓，37 孵育 30 分鐘;
4.洗板：將液體倒入孔中，加入1個洗滌液（300公升孔）洗板5次，拍乾;
5.顯色：將預先製備好的底物溶液加入微孔板中，100 l孔，混勻，在37 l下避光孵育10分鐘;
6.終止：向微孔板中加入100l孔終止溶液，輕輕搖動微孔板，直至顏色均勻;
7.讀數：在20分鐘內讀取450nm處的吸收值。
判決：
1.ASFV負參考的OD值表示為ODN; ASFV 陽性參考的 OD 值表示為 ODP; 樣品的OD值表示為ODS;
2.截止值（閾值）的計算：截止值=ODN+015；
3.測試建立條件：ODN值015 且 ODP 值為 05、測試結果有效，否則將重新進行測試;
4.結果：樣品OD值截止，結果為陰性; 截斷樣品的OD值，判斷結果為陽性。
筆記：
1.請嚴格按照說明進行操作。
2.該套件應由經過充分培訓的人員使用。
3.不同批號的試劑盒不能混用。
4.該套件的每個元件只能使用一次，不能重複使用。
5.整個實驗應盡可能在清潔無塵的環境中進行。
6.使用前，試劑盒必須與待測試的樣品平衡至室溫。
7.濃縮洗滌液使用前需稀釋20倍，若洗滌液結晶，放置37即可溶解。
8.為避免樣品中出現任何潛在的生物危害，應將測試樣品視為傳染性樣品，並避免與**和粘膜接觸。
9.應每天使用洗板機，校正注液量和殘留量，注意管道是否暢通無阻。 洗滌時，確認每個孔都裝滿了洗滌液。 每次洗滌後，將微孔中的液滴拍在無塵吸水紙上。 下一步應在板材清洗後立即進行，不應讓板材乾燥。 避免長時間中斷方案，以確保油井之間的條件一致。
10.如果對照的測量值不在預期範圍內，則實驗無效，應重複實驗。
11.該試劑盒中的所有試劑應儲存 2-8 個月，有效期為 12 個月。 如果板條一次沒有用完，則應將剩餘的板條密封在塑膠袋中並密封儲存。
12.該試劑盒僅供體外診斷使用。