蛋白質標記定量是一種實驗技術,用於分析實驗中與特定標記分子結合的蛋白質的表達和調控,以量化特定蛋白質或多種蛋白質在不同樣品中的表達水平。
蛋白質標記物定量的關鍵步驟通常包括:
1. 蛋白質提取
首先從所研究的生物樣品中提取蛋白質,例如細胞、組織或體液。
2.蛋白質標記:
將蛋白質與化學或同位素標籤結合。 這些標籤可以是穩定同位素標記(例如矽膠)、同位素標記的氨基酸(例如 ITRAQ)或其他特定的化學標記。 這些標記物使研究人員能夠在隨後的分析中區分和量化不同樣品中的相同蛋白質。
圖1使用SILAC(Esthelle等人)進行蛋白質定量。,2019)
3. 蛋白質分離鑑定
通過液相色譜 (LC)、二維凝膠電泳 (2D-PAGE) 和其他技術分離蛋白質。 之後,通常使用質譜 (MS) 技術鑑定和定量標記的蛋白質。
4. 資料分析
使用生物資訊學工具分析獲得的資料,並比較不同樣品或處理之間蛋白質表達的差異。
圖2SILC 與二甲基標記。
蛋白質標記物定量服務在生物醫學研究、藥物開發、疾病診斷等領域有著廣泛的應用,特別是在研究蛋白質在不同條件下如何表達和調控方面。 通過定量分析蛋白質表達,研究人員可以更好地了解疾病的機制,發現潛在的生物標誌物,或評估藥物的作用。
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