細胞分選的常用方法
細胞分選是免疫學研究、幹細胞研究、細胞**、腫瘤學研究等多個研究領域不可避免的實驗程式,只有當從多細胞樣品中分離出具有特定性質的細胞以達到一定的純度時,才能進行後續分析。
從廣義上講,細胞分選分為兩大類常用方法:基於細胞物理性質的密度梯度離心法和基於免疫識別特性的方法。 但前者分離的細胞純度低、特異性差、表面標記不明確,嚴格來說應算作細胞分離。 基於免疫識別特徵的方法包括螢光啟用細胞分選(FACS)和磁啟用細胞分離(MACS)。
流動和磁選的基本原理
FACS的誕生得益於流式細胞術的興起,流式細胞術的基本原理是,當含有單個細胞的液滴通過雷射束時,各種螢光素、螢光染料及其物理和生物學性質使細胞的散射光訊號不同,並根據訊號差異賦予液滴電荷, 使路徑在通過高壓靜電場時發生偏轉,落入不同的集電極,從而完成對目標電池的分選。
流式細胞術分選原理示意圖。
MACS的基本原理是,通過將具有特異性抗體的免疫磁珠與具有相應抗原的細胞結合,一些細胞被賦予磁性,當樣品緩慢流過磁場時,這些細胞會被困在磁鐵上,而沒有這種抗原的細胞則沒有磁性,不會停留在磁場中, 從而實現靶細胞的分離純化。
磁選原理示意圖。
流式細胞術和磁分離PK的優缺點
FACS和MACS自問世以來就被廣泛使用。 但是,在不同的實驗要求下,FACS和MACS各有優勢,應根據實驗目的選擇更合適的方法。 那麼,FACS和MACS的優缺點是什麼?
首先是成本差異。 流式細胞術裝置價格昂貴,運維用工成本也高。 由於對操作環境的苛刻要求,需要設定單獨的房間由專人操作,並且由於流式細胞儀操作複雜,需要專業操作人員; 關鍵部件**價格昂貴,如果損壞,維修和更換可能是一筆昂貴的費用。 磁選裝置一般只有流式細胞儀的一小部分,操作環境不高,一般實驗室都能進行,而且很容易上手,對操作人員的技術要求也不高。
第二個是對細胞的影響。 由於細胞在流式細胞術過程中需要經過高速流動步驟,FAC對細胞的刺激很大,因此對分選細胞的活力影響很大,不利於後續操作。 磁性分選,尤其是奈米珠,對細胞的影響可以忽略不計。
在分選效率方面,由於流式細胞術需要通過雷射保證細胞單體,因此樣品的細胞濃度不宜過高,否則細胞容易粘連,因此分選速度約為每秒10e4個細胞,而磁選可以達到每秒10e7個細胞。 此外,對於單個處理樣品的體積,磁選遠高於流動分選。
然而,在功能方面,流式細胞術優於磁選裝置,因為它還具有分析功能。 在細胞分選純度方面,流式細胞術可以實現更高的純度,同時進行多引數分選,但磁選也可以提高靶細胞的純度,通過多次分選實現多標記分選。 然而,當需要根據細胞內指示劑對細胞進行分選時,磁性分選是不可能的。
那麼流選與磁選,你選擇哪乙個呢?
sophcyte崑崙全自動細胞製備機集清洗、離心、分選、培養等功能於一體,並配有全封閉管道,可實現電池製備過程中的高度整合化、規模化、自動化和國產化替代,保證電池產品質量的一致性和穩定性,有效降低企業研發成本和潔淨廠房運維成本, 並滿足多種細胞產品的製備需求。
Sophcyte Changbai細胞分選平台它是一種基於磁分離技術的自動化細胞分選系統,採用一次性管路,通過簡單的管路安裝和引數設定,即可在無菌條件下實現靶細胞的富集或去除。 整個過程安全高效,產品純度高,**率高,細胞活力高,重複性好。 在實現細胞分選功能的基礎上,還可以根據工藝靈活設定和優化引數和流程,同時滿足分級許可權管理、電子記錄和審計跟蹤、預置遠端操作埠等功能。
新協生物科技SophMag 手動磁性分選套件它分為磁架、磁選機和分選柱三部分。 裝滿鐵球的分選柱放入磁選機後,分選塔內的鐵球被磁選機的永磁場磁化,形成高強度梯度磁場。 然後通過安裝的分選柱將用超順磁珠標記的細胞與目標細胞分離,並將細胞與目標細胞分離,從而達到分選或去除的目的。