本文件在 theiler 中提供'實驗設計和結果由S鼠腦脊髓炎病毒（TMEV）引起的脫髓鞘疾病模型。 TMEV感染後，易感的SJL小鼠發展為類似於進行性多發性硬化症（MS）的慢性進行性脫髓鞘疾病。 這些小鼠表現出進行性殘疾，伴有運動和感覺功能喪失，這可以通過各種裝置和協議進行評估。 其中，Rotarod效能測試是一種常用的行為測試，因其提供客觀的測量而受到青睞。 該測試生成乙個客觀的、可測量的、連續的變數，允許評分者之間達成幾乎完美的一致性。 然而，為了實現實驗室間的可靠性，需要複製各種測試引數。 因此，本文為RotoRod測試的具體測試引數提供了建議，包括杆的大小、速度和加速度，以及對動物進行的訓練和資料處理量。
1.小鼠模型（TMEV誘導的脫髓鞘疾病）。
將裝有 4 至 6 週齡雌性 SJL Jhan 小鼠的籠子從支架上移到舒適的工作空間。 標記小鼠（例如，帶有耳標或耳洞）以單獨評估臨床和組織病變。
用 29 號胰島素注射器和針頭吸出 30 L TMEV 感染倉庫（2 x 10 6 斑塊形成單位）PFU）在PBS中。
準備麻醉氣體機：檢查系統，確保整個過程中有足夠的氧氣和異氟烷**。
將流量計開啟至 1 L min。 將動物放入誘導室並關閉頂部。 將蒸發器開啟到 35%並監視動物躺下。
將動物從腔室中取出，並通過捏爪子來測試小鼠，以確保充分麻醉。 對強烈捏捏缺乏反應表明麻醉充分。
用70%異丙醇清潔注射部位。
通過手持注射將30LTMEV感染儲液器注射到右大腦半球（圖1）。 注射部位大約在眼睛和耳線之間，遠離中線。
一旦滑鼠完全清醒並處於活動狀態（通常為 3-5 分鐘），將其放回保持籠中。
在TMEV感染後3至6個月，根據疾病進展的速度，通過排洩或心臟灌注對小鼠實施安樂死。
二、實驗過程
RotoRod 裝置用於在 TMEV 感染之前測試小鼠，以使它們熟悉該裝置並評估它們正常的基礎平衡、協調和運動控制能力。
5 dpi（即 TMEV 感染前 5 天），開始適應方案。 在進行Rotorod測試之前，讓小鼠在測試室中適應環境至少30分鐘。
確保 Rotorod 裝置和計算機均已插入並相互連線（見圖 1）。 根據表 1 中描述的 -5 dpi 訓練協議引數預設 Rotarod。 儲存包含日期和標識資訊的工作文件。
將要測試的團隊的籠子從架子上移到Rotarod旁邊的桌子上。 通常一次測試6只小鼠。 用尾巴撿起滑鼠，將其放在滑軌上，背對操作員。 重複此步驟，直到第四只滑鼠就位。 如果有老鼠跌倒或跳躍，請將它們放回輪子上，直到所有老鼠都就位。 忽略任何轉身面對操作員的老鼠。
一旦所有小鼠都就位，按“Enter”按鈕開始實驗。 觀察計時器自動開始計時並顯示每條道路的每分鐘轉數 （rpm）。
記錄每只滑鼠從滑軌上掉下來時的轉速以及它在滑軌上停留的時間。 執行器將繼續旋轉，直到最後乙隻滑鼠掉落。
滑鼠掉落後，用紙巾清除流道上的糞便和尿液。 尿液和糞便可能會影響小鼠抓握跑步者的能力。
休息3分鐘後，給予小鼠第二次和第三次試驗。 單次試用的最長時間為 240 秒。 每個考試日共進行3次考試。
將滑鼠放回原位，然後放回架子。 在實驗結束時，用肥皂和水清潔旋轉以去除所有糞便。 用70%乙醇擦拭底板。 通過噴灑整個機器二氧化氯進行消毒。
在 -4、-3、-2 和 -1 pi 的日子裡，根據表 1 中的相應訓練協議引數預設 Rotrod，並重複步驟 21.2 至 21.12。
獲得基線資料後，小鼠受到TMEV感染。 感染後允許 6 天的恢復期。
表中列出了訓練和實驗階段的具體引數，包括每次試驗的起始速度、最大速度、加速度、試驗次數和試驗間隔。