背景迴圈腫瘤細胞（CTCs）是脫落到血液中的實體瘤上皮細胞，與腫瘤轉移、耐藥、預後等高度相關。 大多數迴圈腫瘤細胞在表面表達上皮細胞粘附分子（EPCam），因此一些方法使用EPCAM直接捕獲CTC。 然而，近年來的大量研究證明，epCAM的表達具有相當的異質性，並且epCAM在不同組織**的細胞中，甚至同一腫瘤組織內的細胞中的表達，前後差異很大，這使得依賴EPCAM捕獲CTCs的方法具有很大的不確定性，甚至完全無法捕獲。 減法富集（SE）技術完全獨立於腫瘤細胞表面標誌物（如EPCAM）的表達，利用免疫磁性顆粒偶聯針對人白細胞表面抗原的特殊單轉殖抗體組合和分離非血源性細胞的特殊離心培養基，快速有效地去除腫瘤患者血液中的紅細胞、白細胞和血漿蛋白， 從而有效地富集患者外周血標本中的迴圈稀有細胞，包括**來自各不同組織實體瘤的迴圈腫瘤細胞、迴圈血管內皮細胞、幹細胞等。獲得的腫瘤細胞既不被磁珠包裹，也不與任何針對腫瘤細胞表面標誌物（例如eEPCAM）的抗體結合，從而避免了細胞內訊號通路的啟用。 與其他常規方法不同的是，本實驗中紅細胞的去除避免了使用低滲裂解法，從而最大限度地減少了對富集腫瘤細胞的損傷，使得到的靶細胞保持良好的自然狀態和細胞形態，可應用於後續的一系列形態學和功能研究。 如免疫螢光染色-染色體螢光原位雜交（IFISH）、蛋白表達等，以及借助顯微切割技術獲得的單個腫瘤細胞的遺傳分析。
CTC-iFISH檢測在腫瘤體液活檢中的臨床意義免疫螢光染色 - 染色體螢光原位雜交 （IFISH）。在區分血源性和非血源性細胞的基礎上，將免疫螢光染色和染色體螢光原位雜交技術成功融入免疫螢光染色-染色體螢光原位雜交技術平台（TM-ifish）的同時實施，在區分血源性細胞的同時，可有效區分迴圈血管內皮細胞（CECs）和迴圈腫瘤細胞（CTCs）細胞，從而大大增加了血細胞數量 CTC測定的特異性。通過IFISH方法檢測到的CTC細胞可用於一系列基因、蛋白質或其他相關功能的後續單細胞或多細胞研究。
CTC-iFISH腫瘤液體活檢在不同階段具有不同的臨床意義：（1）早期診斷、輔助診斷和基線預後;（2）新輔助化療;（3）術前後CTC的動態變化和**;（4）檢測MRD等的**情況。
CTC-iFISH檢測在美傑醫藥中的實際應用
在多年的CTC-IFISH實踐中，Mindjet醫學病理中心積累了豐富的臨床檢測和科研經驗。 目前可檢測出多種腫瘤標誌蛋白，包括：泛癌epcam、CK、波形蛋白等;腫瘤特異性蛋白：PSMA、CA199、CA125等;幹細胞蛋白：CD44、CD133等;**靶蛋白：HER2、PD-L1等 搭載CytoIntelligen的CTC相富集和iFISH檢測試劑盒，邁捷醫療可以進行靶向資料和模組分析，全面助力眾多客戶的臨床檢測和科研工作。 
圖 1：原位檢測同一 CTC 細胞上染色體數量異常以及 HER2 和 PD-L1 腫瘤標誌物的表達。
圖 2：MindJet CTC-iFISH 染色示例**，共檢測到 20 個迴圈腫瘤細胞和 0 個迴圈腫瘤細胞團塊。
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