Edman降解法是測定肽氨基酸序列的經典方法

Edman降解法是測定肽和蛋白質氨基酸序列的經典方法。 這種方法由 Pehr Edman 在 20 世紀 50 年代開發，至今仍被廣泛使用，尤其是對於較短的肽片段。

一、原理：

1.Edman 降解基於從肽的 N 末端連續去除氨基酸並對其進行鑑定的原理。

2.首先，肽的N端與Edman試劑（苯酚異硫氰酸）反應形成穩定的酯類化合物。

3.隨後，在弱酸條件下，這種酯裂解並釋放出與EDMAN試劑形成的衍生氨基酸。 這個過程不會破壞多肽的其他部分。

4.釋放的衍生氨基酸可以通過色譜法或其他方法進行鑑定。

5.重複上述過程，可以逐個鑑定多肽的氨基酸序列。

2.優點：

1.特 異性：

Edman降解方法非常特異性，僅針對N端氨基酸。

2.準確性：

理想情況下，這種方法可以提供非常準確的測序結果。

3. 限制：

1.長度限制：

雖然該方法非常準確，但通常僅適用於較短的肽片段，通常在 50-60 個氨基酸以內。 對於較長的肽或蛋白質，需要將它們切割，然後單獨測序。

2.敏感性：

需要足夠數量的樣本來確保測序的準確性。

四、應用：

雖然現代質譜技術在蛋白質和肽測序中已經變得非常流行，但Edman降解方法仍然是一種有價值的工具，特別是當質譜方法不適用或需要驗證質譜結果時。