【IHC實驗】製備石蠟包埋的組織切片。
石蠟包埋組織切片製備是免疫組化（IHC）實驗中必不可少的步驟，其目的是用石蠟固定和包埋組織樣品，使其適合切片和免疫組織化學染色。 以下是製備石蠟包埋組織切片的詳細步驟和注意事項。
1.材料收集和固定。
收集材料時，應盡可能選擇具有代表性的組織樣品，並迅速置於預冷的4%多聚甲醛中進行固定，以保持細胞的形態和結構。 固定時間一般為30分鐘至1小時，具體取決於組織的型別和大小。
2.脫水和透明度。
脫水是製備石蠟包埋組織切片的重要步驟，其目的是從組織中去除水分，為下一步的蠟浸泡做準備。 常用的脫水劑是梯度醇，由低濃度逐漸更換為高濃度，每次更換需要停留幾分鐘到十分鐘，以保證脫水效果。 二甲苯一般用作澄清劑，能迅速去除組織中的酒精，使組織透明。
3.蠟浸泡和嵌入。
蠟浸泡是將組織浸泡在熱石蠟中，使石蠟滲透到組織中並取代組織中的清除劑。 這一步需要很好地掌握溫度和時間，以防止組織過熱或石蠟凝固。 包埋是將蠟浸漬的組織放入模具中，然後倒入熱石蠟將其密封。 為了使切片容易脫落，包埋時應將組織平放在模具底部，並用小棍等工具壓實組織。
4.切片和修補。
嵌入的組織塊被切片，通常厚度為 3-5 微公尺。 切割部分應立即連線到載玻片上，並在室溫下自然乾燥。 為了使切片更好地粘附在載玻片上，可以將蛋白質甘油或其他粘合劑滴加到載玻片表面。
5. 注意事項。
1.採集固定時，應選擇有代表性的組織樣本並快速固定，以保持細胞的形態和結構。
2.脫水時，要掌握梯度醇的置換順序和停留時間，保證脫水效果。
3.浸漬包埋時，應控制溫度和時間，防止組織過熱或石蠟凝固。
4.切片時應控制厚度和均勻性，以保證染色結果的準確性和可比性。
5.修補時，請選擇合適的粘合劑，以確保該部分平整並牢固地附著在載玻片上。
6.操作時注意安全，避免接觸有毒化學品和高溫加熱物品。
7.保持實驗室的清潔和衛生，以防止交叉汙染和細菌汙染。
8.實驗結束後，應及時清洗儀器和器具，並按實驗室規定處理廢物。
綜上所述，石蠟包埋組織切片製備是IHC實驗中的重要步驟之一，每乙個細節都需要認真對待，以確保實驗結果的準確性和可靠性。 通過不斷的實踐和探索，可以進一步提高石蠟包埋組織切片製備的技術水平，為科學研究和臨床診斷提供更好的服務。