免疫組化 （IHC） 測定 - 滅活。
免疫組化 （IHC） 測定是一種常用的生物學技術，用於檢測細胞或組織中特定蛋白質的表達水平。 在IHC實驗中，通常需要滅活以消除內源性酶和活性物質對實驗結果的影響。 本文將介紹滅活處理在IHC實驗中的方法和作用。
1.滅活處理在IHC實驗中的作用。
滅活是 IHC 實驗中最關鍵的步驟之一。 通過滅活，可以消除細胞或組織中內源性酶和活性物質的作用，提高實驗的特異性和靈敏度。 常見的內源性酶和活性物質包括內源性過氧化物酶、苯酚氧化酶和核酶。 這些酶和活性物質可能會干擾 IHC 實驗中的標記訊號，導致非特異性染色或背景雜訊增加。 因此，通過滅活可以有效減少這些干擾物對實驗結果的影響。
2.IHC實驗中的滅活處理方法。
1.煮沸法：煮沸法是一種常用的滅活處理方法。 細胞或組織樣品可以在高溫高壓環境中進行處理，以有效滅活內源性酶和活性物質。 這是通過將細胞或組織樣品放入試管中，加入適量的水或緩衝液，然後將試管放入高壓鍋中煮沸一定時間來完成的。 煮沸後，細胞或組織中的內源性酶和活性物質被破壞，降低了背景噪音，增加了實驗的特異性。
2.酶抑制劑法：酶抑制劑法是通過新增特異性酶抑制劑來抑制內源性酶和活性物質的方法。 常見的酶抑制劑包括苯甲基磺醯氟 （PMSF）、抑肽酶和胃蛋白酶抑制劑。 這些抑制劑可以抑制內源性酶和活性物質的活性，從而降低背景雜訊，增加實驗的特異性。 這是通過向細胞或組織樣品的處理溶液中加入適量的酶抑制劑，然後按照方案來完成的。
3.化學試劑法：化學試劑法是通過新增化學試劑使內源性酶和活性物質失活的方法。 常見的化學試劑有甲醇、乙醇、丙酮、甲醛等。 這些化學試劑可以與內源性酶和活性物質發生反應，從而破壞它們的活性。 這是通過在細胞或組織樣品的處理溶液中加入適量的化學試劑，然後按照實驗程式來完成的。
3.IHC實驗中滅活處理的注意事項。
1.選擇滅活方法時，應根據細胞或組織的型別和實驗的具體要求進行。不同的細胞或組織以及不同的實驗要求可能需要不同的滅活處理。
2.在進行滅活處理時，應注意控制溫度、時間和pH值等引數。 這些引數可能會影響滅活效果和實驗結果。
3.在進行IHC實驗時，應注意遵循無菌操作原則，避免樣品汙染對實驗結果的影響。
4.在進行滅活處理時，應注意安全問題。 例如，使用煮沸法時，應注意防止壓力鍋**等安全事故的發生。 使用化學試劑法時，應注意選擇合適的化學試劑和濃度，以免對人體造成傷害和對環境造成汙染。
總之，免疫組化 （IHC） 實驗中的滅活是最關鍵的步驟之一。 通過選擇合適的滅活方法，控制相關引數，可有效提高實驗的特異性和靈敏度，為科學研究提供準確可靠的資料支援。