tau蛋白泛素化鑑定工作流程

Tau 蛋白是一種微管相關蛋白，主要存在於神經細胞中，參與微管的穩定。 在某些神經退行性疾病中，例如阿爾茨海默病（Alzheimer）。'S 病，AD），tau 蛋白可能異常磷酸化和聚集，形成所謂的 tau 團塊或神經原纖維纏結。

泛素化是蛋白質的翻譯後修飾，涉及將乙個或多個泛素分子連線到靶蛋白上。 這種修飾通常標記蛋白質進行降解，但也參與許多其他細胞過程。

圖1泛素化修飾研究路線。

tau蛋白泛素化的鑑定主要是為了確定tau蛋白是否泛素化以及泛素化發生在哪些位點。 以下是基本步驟：

1.樣品製備：

Tau 蛋白是從相關細胞或組織中提取的。

2.免疫沉澱：

使用針對 tau 蛋白的抗體進行免疫沉澱，以富集樣品中的 tau 蛋白。

3.蛋白質電泳：

沉澱的蛋白質通過SDS-PAGE分離。

4. 免疫印跡分析：

使用抗泛素抗體進行蛋白質印跡分析，以檢測 tau 蛋白是否泛素化。

5. 質譜分析

為了準確識別tau蛋白上的泛素化位點，可以進行進一步的質譜分析。

6. 資料分析

基於質譜資料解析tau蛋白的泛素化位點。

tau蛋白的泛素化可能與其在疾病中的聚集和降解機制有關，因此其鑑定對於了解神經退行性疾病的分子機制具有重要意義。