蛋白質磷酸化修飾是細胞訊號轉導中的關鍵事件，因此準確檢測和定量它們至關重要。 檢測蛋白質磷酸化修飾的常用方法主要包括：
1.western blot：
使用磷酸化位點特異性抗體檢測磷酸化蛋白。 該方法可以提供特定磷酸化位點的半定量資料。
1.優點：相對簡單靈敏; 可以定性和定量分析。 2.缺點：需要高特異性抗體; 無法確定精確的磷酸化位點。 2.免疫沉澱 （IP）：
使用特異性抗體從細胞裂解物中沉澱目標蛋白，然後進行蛋白質印跡以檢測磷酸化。
1.優點：可以研究蛋白質-蛋白質的相互作用。 2.缺點：需要高質量的抗體; 一些弱相互作用可能會丟失。 3.質譜 （MS）：
非常適合鑑定新的磷酸化位點和定量磷酸化蛋白。 結合液相色譜（LC-MS），可以鑑定和定量數千個磷酸化位點。
1.優點：能夠確定精確的磷酸化位點; 定量能力強; 可以識別多個磷酸化位點。 2.缺點：裝置昂貴，需要專業知識; 樣品處理有許多步驟4.蛋白磷酸化陣列：
這是一種高通量方法，可以在單個實驗中檢測多種蛋白質的磷酸化狀態。
1.優點：高通量; 可以同時檢測多個目標。 2.缺點：可能需要複雜的樣品處理和資料分析。 5.放射性標記：
例如，使用[32p]正磷酸鈉進行細胞標記，然後對蛋白質進行免疫沉澱和電泳以檢測其放射性以確定蛋白質的磷酸化狀態。
1.優點：靈敏度極高，可直接檢測。 2.缺點：涉及放射性物質，存在健康和安全隱患，無法確定具體磷酸化位點。 6.流式細胞術：
使用特異性磷酸化抗體與螢光偶聯二抗相比，可以在單細胞水平上檢測磷酸化事件。
1.優點：能夠在單細胞水平上進行分析; 多引數分析可以與其他細胞標誌物一起進行。 2.缺點：需要特異性抗體; 僅限於可懸浮的細胞樣品。 8.ELISA（酶聯免疫吸附測定）：
使用特異性磷酸化抗體，可以對磷酸化蛋白進行定量分析。
1.優點：適用於高通量篩選; 定量準確。 2.缺點：需要特異性抗體; 只能針對已知目標進行測試。 每種方法都有其優點和侷限性，選擇哪種方法取決於實驗的目的、可用的裝置和樣品的型別。