基於蛋白質SUMO的常用檢測方法

Mondo 健康 更新 2024-02-24

蛋白質 SUMOLATION 是一種重要的翻譯後修飾過程,涉及小泛素樣修飾蛋白 (SUMO) 與靶蛋白的共價結合。 相聚化在許多生物過程中起著重要作用,例如核轉運、轉錄調控、細胞週期程序和應激反應。 以下是檢測蛋白質相撲化的常用方法:

1.western blot:

使用特異性抗SUMO抗體,可以直接檢測經過SUMO修飾的蛋白質。 Sumoization通常會導致蛋白質分子量的增加,這可以在電泳分離後觀察到。

2.免疫沉澱 (IP) + 蛋白質印跡:

首先用特異性抗體從細胞裂解物中沉澱目標蛋白,然後使用抗 SUMO 抗體通過蛋白質印跡檢測 SUMO 狀態。

3.親和純化後的質譜分析:

通過對SUMO結合位點進行親和純化,可以從複雜樣品中富集SUMO基化蛋白,然後使用質譜法進行鑑定。

4.生物發光共振能量轉移 (BRET):

細胞內檢測相撲的動態過程。 它通常涉及將螢光蛋白和螢光蛋白標籤分別附著在靶蛋白和 SUMO 上,然後通過測量兩者之間的能量轉移來檢測它們的相互作用。

5.共聚焦螢光顯微鏡:

使用螢光標記的SUMO和目標蛋白,可以直接在細胞內視覺化基於SUMO的修飾的位置和動力學。

6.酶聯免疫吸附測定 (ELISA):

使用特異性抗SUMO抗體,可以定量SUMO蛋白。

相關問題答案

    基於 SUMO 的蛋白質翻譯後修飾是什麼意思?

    Sumoylation 是蛋白質的翻譯後修飾和泛素化樣修飾。它涉及小泛素樣修飾 SUMO 與底物上的賴氨酸殘基共價連線。在哺乳動物中,已經鑑定出三種主要的 SUMO 亞型,包括 SUMO SUMO 和 SUMO。與泛素化類似,SUMO 基化由一系列酶催化,包括 E SUMO 啟用酶 SAE SAE ...

    蛋白質磷酸化修飾的常見檢測

    蛋白質磷酸化修飾是細胞訊號轉導中的關鍵事件,因此準確檢測和定量它們至關重要。檢測蛋白質磷酸化修飾的常用方法主要包括 .western blot 使用磷酸化位點特異性抗體檢測磷酸化蛋白。該方法可以提供特定磷酸化位點的半定量資料。.優點 相對簡單靈敏 可以定性和定量分析。.缺點 需要高特異性抗體 無法確...

    蛋白質組學前處理方法

    蛋白質組學前處理方法 蛋白質組學是研究蛋白質表達 功能和相互作用的科學領域。在進行蛋白質組學研究之前,需要一系列的處理方法來確保實驗結果的準確性和可靠性。本文將介紹前蛋白質組學處理方法,包括樣本採集 蛋白質提取 蛋白質分離和蛋白質鑑定。.樣品採集。在蛋白質組學研究中,樣本採集是關鍵的第一步。為了保證...

    用於蛋白質譜分析檢測的蛋白質-蛋白質相互作用網路的構建與分析

    在生物製藥領域,研究蛋白質相互作用是理解細胞和生物體中生物過程的關鍵。蛋白質 蛋白質相互作用網路揭示了蛋白質之間複雜的相互作用,為疾病發病機制和藥物開發提供了重要線索。蛋白質譜分析作為一種有效的方法,被廣泛用於構建和分析蛋白質 蛋白質相互作用網路,從而促進了生物製藥領域的研究進展。蛋白質是生物體中最...

    液體肥料檢測報告 蛋白質質量檢測

    液體肥料。液體肥是一種高效 快速的肥料,其優點是能迅速被植物吸收利用,比固體肥料更具優勢。液體肥料的種類很多,包括氮肥 磷肥 鉀肥 有機物 pH調節劑 蛋白質 重金屬和礦物質等。下面我們將詳細介紹每種液體肥料的特點和功能。.氮 磷 鉀。氮,磷和鉀是植物生長最基本的元素,其中氮是植物生長的重要營養物質...