化學發光免疫測定試劑盒
1.向每個孔中加入 100 l 標準品或樣品,並在 37°C 下孵育 90 分鐘。
2.從孔中倒出液體,拍乾,加入 100 l 生物素化抗體工作溶液,並在 37°C 下孵育 60 分鐘。
3.洗滌 3 次。
4.加入 100 l 酶偶聯工作溶液,並在 37°C 下孵育 30 分鐘。
5.洗滌 5 次。
6.加入100l發光底物混合物,並在37°C孵育約5分鐘。
7.立即測定每個孔的化學發光值。
8.結果計算。
實驗注意事項。
1.抗原和抗體的儲存:抗原和抗體應嚴格按照說明書的要求儲存,避免反覆冷凍和長期暴露在高溫下。 同時,重要的是要確保試劑盒沒有過期,以獲得可靠的實驗結果。
2.取樣技術:新增時,新增量應準確,不應產生氣泡,並應避免在孔壁邊緣,以免影響與固體表面的接觸。 每個孔旁邊應放置乙個加藥對照孔,以監測加藥的準確性和重現性。
3.孵育:孵育是ELISA實驗中的重要步驟,孵育時間和溫度的控制對於抗原抗體反應的進行和結果至關重要。 必須嚴格按照說明書的要求進行孵育,必須注意保持恆溫狀態。
4.洗滌:洗滌是ELISA實驗中必不可少的步驟,可去除未結合的物質並提高測定的特異性和靈敏度。 洗滌時,確保每次洗滌的洗滌時間足夠,並更換洗滌液以保證洗滌效果。 同時,要避免在洗滌過程中形成氣泡,以免影響洗滌效果。
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